背景[1-6]
基于細胞的藥物篩選與分析服務(wù)作為一種大規(guī)模的、系統(tǒng)生物學的手段，基于細胞的藥物篩選可以在活細胞中對化合物的作用進行檢測和評估，進而篩選出更為有效和安全的藥物。細胞水平的藥物篩選是更接近生理條件的一種藥物篩選模型，其模型是擬設(shè)計藥物作用的靶細胞，應(yīng)用細胞培養(yǎng)技術(shù)獲取所需細胞，將這些細胞與候選化合物相互作用，通過與生化水平篩選類似的檢測技術(shù)測定化合物的作用能力，從而對化合物進行篩選。優(yōu)點：細胞水平的藥物篩選模型更接近生理條件，篩選的準確率更高，但是需要建立細胞模型，操作更復雜，成本更高，數(shù)據(jù)之間的平行性較差，另外由于技術(shù)的限制，有些靶標還不能進行細胞水平的藥物篩選。
基于細胞的藥物篩選分析，其包括以下步驟：
1. 在培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)細胞群體，
2. 依據(jù)所述細胞類型、所述細胞的生理特性、所形成組織的生理特性、原料藥的作用方式和培養(yǎng)環(huán)境中的至少一種來界定至少兩個監(jiān)測時間點，
3. 至少在一個治療時間點將原料藥施加至培養(yǎng)細胞，
4. 至少在所述兩個監(jiān)測時間點監(jiān)測所述原料藥對細胞或所形成組織的影響。
基于細胞的藥物篩選與分析服務(wù)包括多種高通量篩選、高內(nèi)涵篩選、劑量藥效分析、特異性分析、選擇性分析等。
1.高通量篩選
高通量篩選（High-Throughput Screening,HTS）是指在分子水平或細胞水平上，通過微板的形式、自動化的操作系統(tǒng)和靈敏快速的檢測儀器進行實驗操作和結(jié)果數(shù)據(jù)的采集，可以在同一時間對大量樣品進行檢測并通過以計算機對實驗數(shù)據(jù)進行分析處理，得到大量有意義的數(shù)據(jù)。我們的高通量設(shè)備可以使用384孔板，運用多種檢測技術(shù)如化學化光、熒光、吸光度等，在分子或細胞水平甚至在3D培養(yǎng)的細胞模型上對化合物的滲透性、穩(wěn)定性、代謝途徑、代謝產(chǎn)物、細胞毒性等進行大批量地檢測。
2.高內(nèi)涵篩選
高內(nèi)涵篩選（High-Content Screening，HCS）是一種基于細胞成像和多參數(shù)數(shù)據(jù)分析的技術(shù)，其強大的分析軟件可以同時監(jiān)測和分析單細胞水平的多個參數(shù)，目前在生命科學和新藥篩選領(lǐng)域具有非常廣泛的應(yīng)用。高內(nèi)涵篩選可以在保持細胞結(jié)構(gòu)和功能完整的前提下，同時檢測化合物對比細胞形態(tài)與數(shù)目、細胞核大小與形狀、細胞膜通透性、線粒體膜電位、細胞色素C釋放等方面的影響，在單次實驗中即可獲得大量的、直觀的數(shù)據(jù)，并可以全面監(jiān)測和評估待測化合物的細胞毒性及其作用機制，大大優(yōu)于常見的單終點檢測方法。
高通量篩選作為藥物篩選的一種方法，它并不是一種萬能的手段，特別是在中藥研究方面，其局限性也是十分明顯的。首先，高通量篩選所采用的主要是分子、細胞水平的體外實驗模型，因此任何模型都不可能充分反映藥物的全面藥理作用；其次，用于高通量篩選的模型是有限的和不斷發(fā)展的，要建立反映機體全部生理機能或藥物對整個機體作用的理想模型，也是不現(xiàn)實的。
應(yīng)用[7-9]
基于細胞的藥物篩選與分析服務(wù)可用于藥物開發(fā)和設(shè)計：
在穩(wěn)定表達TFEB-GFP細胞系的構(gòu)建及促TFEB入核藥物篩選的研究中構(gòu)建穩(wěn)定表達TFEB-GFP的HeLa細胞系，并利用其篩選促進轉(zhuǎn)錄因子EB(TFEB)入核藥物．利用分子生物學技術(shù)成功構(gòu)建了重組表達載體pLVX-AcGFP1-N1-TFEB，并進行慢病毒包裝，進而侵染HeLa細胞，通過嘌呤霉素篩選陽性單克隆細胞株．采用熒光顯微鏡技術(shù)及免疫印跡技術(shù)(Western blot)證實穩(wěn)定表達TFEB-GFP細胞株構(gòu)建成功。
利用該細胞模型篩選得到促TFEB入核藥物鹽酸舍曲林(Sertraline HCl)，此藥物能夠促進轉(zhuǎn)錄因子TFEB靶基因的表達，并促進細胞自噬．MTT實驗表明Sertraline HCl抑制腫瘤細胞活力，其對腫瘤細胞的殺傷作用可能是通過其激活自噬引起的。
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