背景^[1-6]

羊多克隆抗體制備使用羊進行免疫，收集血清后，或直接使用抗血清進行檢測，或進行純化獲取純化的抗體。多克隆抗體是由免疫的宿主通過不同來源（多克?。┑腂細胞分泌產(chǎn)生的抗體。一組多克隆抗體應識別同一抗原，同時由于是多克隆，所以往往對同一抗原的多個不同表位進行識別。多克隆抗體制備原理：抗原刺激機體，產(chǎn)生免疫學反應，由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。

一般而言，抗體按靶位點不同主要分為單克隆抗體和多克隆抗體，由多個B淋巴細胞克隆產(chǎn)生的，受到多種抗原決定簇刺激并可以與多種抗原表位結合的抗體就是多克隆抗體。多克隆抗體優(yōu)勢：制備成本比同物種來源的單克隆抗體低；制備周期較同物種來源的單克隆抗體短；可同時檢測同一抗原的多個表位；適用于免疫沉淀、ELISA等實驗；更高的親合力（avidity）；抗原有兩個基本特性，即抗原性和免疫原性。

有抗原性的物質不一定有免疫原性，所以由此引出半抗原和完全全抗原，半抗原必須經(jīng)過經(jīng)過一定的改造（偶聯(lián)蛋白載體BSA，OVA或者HSA等大分子物質）方能成為完全。一般而言完全抗原分子量越大（大于10KDa），結構越復雜引起免疫反應的能力也就越強?？贵w就是能與特異性抗原結合的免疫球蛋白，抗體一般分為多克隆抗體和單克隆抗體，多克隆抗體能與抗原的多個表位結合。

多抗一般制備流程：完全抗原的準備→兔子的免疫→效價檢測和終放→抗體親和純化→抗體的濃縮和保存。

應用^[7][8]

羊多克隆抗體制備可用于小分子、多肽、修飾多肽、蛋白、融合蛋白、修飾蛋白的雜交細胞種類及效價檢測：

在山羊c-Myc基因的原核表達及多克隆抗體和單克隆抗體的制備的實驗中需要羊抗c-Myc蛋白的多克隆抗體以便用于間接ELISA法篩選陽性雜交瘤細胞。c-Myc是一種重要的原癌基因,它可以作為一種轉錄因子,在維持胚胎干細胞的生物學特性和誘導多性干細胞(induced pluripotent stem cells,iPS)形成的過程中發(fā)揮重要的作用。因此制備其相應的多克隆抗體和單克隆抗體非常必要,實驗采用間接ELISA法篩選陽性雜交瘤細胞,應用有限稀釋法對其進行3-4次亞克隆,獲得穩(wěn)定分泌抗c-Myc蛋白抗體的雜交瘤細胞株。

參考文獻

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[8]張昀.山羊c-Myc基因的原核表達及多克隆抗體和單克隆抗體的制備[D].廣西大學,2012.