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丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒的應(yīng)用

2024/2/5 8:36:50 作者:云霄

背景[1-3]

丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒是一種用于檢測丙酸蛛網(wǎng)菌的PCR試劑盒。丙酸蛛網(wǎng)菌是一種常見的細(xì)菌,可以引起多種疾病,如肺炎、敗血癥等。該試劑盒包含以下主要成分:

PCR反應(yīng)液:包含聚合酶、dNTPs、引物等,用于擴(kuò)增丙酸蛛網(wǎng)菌的DNA。

陽性對照:含有已知的丙酸蛛網(wǎng)菌DNA,用于驗證試劑盒的準(zhǔn)確性和可靠性。

陰性對照:不含丙酸蛛網(wǎng)菌DNA,用于排除假陽性結(jié)果。

樣品處理液:用于提取和處理樣品中的DNA。

緩沖液:用于調(diào)節(jié)PCR反應(yīng)液的pH值和離子強(qiáng)度。

其他輔助試劑:如Tris-HCl、EDTA、BSA等,用于調(diào)節(jié)反應(yīng)條件和提高反應(yīng)效率。

使用丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒時,首先需要提取樣品中的DNA,然后將其加入到PCR反應(yīng)液中進(jìn)行擴(kuò)增。通過檢測擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性,可以確定樣品中是否存在丙酸蛛網(wǎng)菌的DNA。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、操作簡便等優(yōu)點,適用于臨床實驗室和研究機(jī)構(gòu)對丙酸蛛網(wǎng)菌的快速檢測和鑒定。

丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒.png

丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒

丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒的操作步驟如下:

1.樣本采集:從患者體內(nèi)采集血液、糞便、組織等樣本,并將其保存在無菌容器中。

2.DNA提?。簩⒉杉降臉颖具M(jìn)行DNA提取,通常采用柱式或磁珠式DNA提取試劑盒。提取后的DNA應(yīng)保存在-20°C或更低的溫度下。

3.PCR反應(yīng)體系準(zhǔn)備:根據(jù)丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒說明書的要求,配制PCR反應(yīng)體系,包括引物、熒光探針、dNTPs、DNA聚合酶等。

4.PCR反應(yīng):將提取的DNA加入到PCR反應(yīng)體系中,進(jìn)行PCR反應(yīng)。反應(yīng)條件和時間根據(jù)試劑盒說明書的要求進(jìn)行設(shè)置。

5.結(jié)果分析:將PCR反應(yīng)后的產(chǎn)物進(jìn)行熒光信號檢測,根據(jù)熒光信號的出現(xiàn)情況判斷是否存在丙酸蛛網(wǎng)菌的感染。

應(yīng)用[4][5]

丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒可以用于蛛網(wǎng)菌屬中分解鉀的菌株

從我國四川省漢源縣富泉礦馬桑樹根際分離到一株能分解鉀的菌株,該菌細(xì)胞為桿狀,近球狀。有時具有分支狀菌絲,成對V形排列。基絲有分隔,斷裂成桿狀或球狀小體,革蘭氏陽性,不運動,兼性厭氧。菌落由初級分支菌絲體組成,灰白色,無氣生菌絲,細(xì)胞壁含有二氨基庚二酸LL-DAP(左旋),甘氨酸、天門冬氨酸、半乳糖、葡萄糖,無特征性糖;細(xì)胞壁組分屬Ⅰ型。發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)生乙酸和異成酸。用原子吸收法測定可溶性鉀,比對照增加49.5%,證明能分解鉀。DNA中G+C為63mol%。通過丙酸蛛網(wǎng)菌PCR試劑盒鑒定可歸入蛛網(wǎng)菌屬(Arachina),但又由于不產(chǎn)丙酸和分解鉀故不同于該屬唯一的丙酸蛛網(wǎng)菌(Arachinapropionica),因此,可能是一個新種,但由于缺少模式種,尚待進(jìn)一步研究。另對該菌制劑進(jìn)行了玉米、水稻的盆栽實驗,結(jié)果說明經(jīng)3號菌分解后的生物礦肥的速效鉀提高6倍多。因此認(rèn)為該菌株具有農(nóng)業(yè)應(yīng)用前景。

參考文獻(xiàn)

[1]Dietary Supplementation of Limosilactobacillus mucosae LM1 Enhances Immune Functions and Modulates Gut Microbiota Without Affecting the Growth Performance of Growing Pigs[J].Zhang Qianqian;Vasquez Robie;Yoo Jeong Min;Kim Sang Hoon;Kang Dae Kyung;Kim In Ho.Frontiers in Veterinary Science,2022

[2]Chiral proofreading during protein biosynthesis and its evolutionary implications.[J].Kumar Pradeep;Bhatnagar Akshay;Sankaranarayanan Rajan.FEBS letters,2022

[3]Effects of phenylpyruvate on the growth performance and intestinal microbiota in broiler chicken.[J].Talpur Mir Zulqarnain;Peng Wentong;Zeng Yuxian;Xie Peipei;Li Jincheng;Zhang Haijun;Shu Gang;Jiang Qingyan.British poultry science,2022

[4]Characteristics of Escherichia coli Isolated from Intestinal Microbiota Children of 0-5 Years Old in the Commune of Abomey-Calavi.[J].Sina Haziz;DahNouvlessounon Durand;Adjobimey Tomabu;Boya Bawa;Dohoue Ghislaine M C;N'tcha Christine;Chidikofan Violette;BabaMoussa Farid;Abdoulaye Idrissou;Adjanohoun Adolphe;BabaMoussa Lamine.Journal of pathogens,2022

[5]任玉忠,周慧玲.蛛網(wǎng)菌屬中分解鉀的菌株[J].微生物學(xué)通報,1998(06):311-313.

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