背景^[1-3]

腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒是一種用于檢測腦膜炎黃桿菌的分子診斷試劑盒。該試劑盒基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)，通過特定的引物擴增腦膜炎黃桿菌的DNA片段，從而實現(xiàn)對該病原體的快速、準(zhǔn)確檢測。

腦膜炎黃桿菌(Neisseria meningitidis)是一種革蘭氏陰性菌，是引起腦膜炎和敗血癥等嚴(yán)重感染的主要病原體之一。PCR(聚合酶鏈反應(yīng))是一種常用的分子生物學(xué)技術(shù)，可以快速、準(zhǔn)確地檢測和鑒定腦膜炎黃桿菌的存在。

腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒是一種專門用于檢測腦膜炎黃桿菌的PCR試劑盒。它通常包含以下成分：

PCR緩沖液：提供反應(yīng)所需的pH值和離子濃度。

dNTPs:提供合成DNA的原料。

Taq DNA聚合酶：用于擴增DNA的酶。

引物：特異性地結(jié)合到目標(biāo)基因上的短片段，用于引導(dǎo)PCR反應(yīng)。

MgCl2:穩(wěn)定Taq DNA聚合酶的活性。

熒光探針或溴乙啶：用于檢測PCR產(chǎn)物。

使用腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒時，首先需要提取待測細(xì)菌的DNA，然后將提取的DNA與引物混合，加入PCR反應(yīng)體系中進行擴增。PCR反應(yīng)結(jié)束后，將產(chǎn)物進行電泳分離，根據(jù)產(chǎn)物的大小和數(shù)量來判斷是否存在腦膜炎黃桿菌基因。

需要注意的是，腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒只能檢測到腦膜炎黃桿菌基因的存在，不能確定具體的菌株。如果需要鑒定具體的菌株，需要使用特異性引物進行PCR擴增。

腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒

腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒的操作步驟如下：

1.樣本采集：從患者體內(nèi)采集血液、糞便、組織等樣本，并將其保存在無菌容器中。

2.DNA提?。簩⒉杉降臉颖具M行DNA提取，通常采用柱式或磁珠式DNA提取試劑盒。提取后的DNA應(yīng)保存在-20°C或更低的溫度下。

3.PCR反應(yīng)體系準(zhǔn)備：根據(jù)腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒說明書的要求，配制PCR反應(yīng)體系，包括引物、熒光探針、dNTPs、DNA聚合酶等。

4.PCR反應(yīng)：將提取的DNA加入到PCR反應(yīng)體系中，進行PCR反應(yīng)。反應(yīng)條件和時間根據(jù)試劑盒說明書的要求進行設(shè)置。

5.結(jié)果分析：將PCR反應(yīng)后的產(chǎn)物進行熒光信號檢測，根據(jù)熒光信號的出現(xiàn)情況判斷是否存在腦膜炎黃桿菌的感染。

應(yīng)用^[4][5]

腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒可以用于細(xì)菌產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶的檢測方法及耐藥性研究

探討并建立在臨床微生物實驗室可用于常規(guī)過篩檢測金屬β內(nèi)酰胺酶的方法,并對陽性菌株的耐藥性加以分析,為臨床合理選擇抗生素提供確切的依據(jù)。

方法收集全自動微生物分析儀分離的液體稀釋法鑒定為耐亞胺培南革蘭陰性桿菌58株,首先采用紙片擴散法(即K-B法)及腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒,用亞胺培南(IMP)和頭孢他啶(CAZ)紙片篩出耐藥菌株;然后以EDTA、CuCl2、FeCl2、2—MPA、MPA為酶抑制劑,頭孢他啶、亞胺培南為底物,在M—H平板上用紙片擴散法進行抗生素協(xié)同敏感性檢測;另外對IMP耐藥株用EDTA/IMP復(fù)合紙片和腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒,即EDTA增效法來檢測MBL。陽性菌株用K-B法檢測其對12種抗生素的敏感性。

腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒結(jié)果(1)對58株入選菌株用兩種底物的紙片篩選,腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒結(jié)果檢出CAZ耐藥27株,IMP耐藥42株。二者都耐藥的有24株;二者都敏感的有13株;IMP耐藥、CAZ敏感的有18株;CAZ耐藥、IMP敏感的有3株。(2)42株耐IMP的革蘭陰性桿菌,用IMP與抑制劑協(xié)同共檢出17株產(chǎn)M-B-L陽性菌。其中嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌9株,銅綠假單胞菌2株(PA1,PA661),腦膜炎敗血黃桿菌3株,假產(chǎn)堿假單胞菌1株,粘金黃桿菌2株。腦膜炎黃桿菌PCR試劑盒總陽性率40.5%(17/42),PA的陽性率為9.1%(2/22)。(3)27株耐CAZ的革蘭陰性桿菌,用CAZ與抑制劑協(xié)同共檢出4株產(chǎn)M-B-L陽性菌。其中嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌2株,銅綠假單胞菌2株(PA1,PA661)?？傟栃月?4.8%(4/27),PA的陽性率為13.3%(2/15)。

參考文獻

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