噻唑藍，英文名為Thiazolyl Blue，英文縮寫為MTT，常溫常壓下為淡黃色結(jié)晶粉末，在醇類有機溶劑中有較好的溶解性。噻唑藍是一種細胞可滲透且?guī)д姷谋壬珓?，具有一定的吸濕性和光敏感性，被廣泛用于檢測細胞中的還原代謝以及測量細胞增殖，細胞毒性和凋亡。需要說明的是該物質(zhì)在活細胞中會從黃色還原為紫色的甲臜。

圖1 噻唑藍的商品圖

性質(zhì)

噻唑藍是一種含有多個富電子雜環(huán)單元的化合物，具有很強的電子親和性和氧化還原活性。這種化合物的化學(xué)穩(wěn)定性較差，主要是因為其分子結(jié)構(gòu)中的富電子雜環(huán)單元容易發(fā)生氧化和其他反應(yīng)。長時間將噻唑藍置于空氣環(huán)境中，容易吸潮并導(dǎo)致其變質(zhì)。吸濕會引起噻唑藍分子結(jié)構(gòu)中的水解反應(yīng)，導(dǎo)致其性質(zhì)和性能發(fā)生變化。因此，為了保持它的化學(xué)穩(wěn)定性和性能，一般要求將該物質(zhì)存放在低溫環(huán)境中可以減緩其分子反應(yīng)的速度。

生物應(yīng)用

噻唑藍常用于基于MTT檢測方法的細胞活力、細胞增殖或細胞毒性檢測，因為噻唑藍具有正電荷，它可以穿過細胞膜并被線粒體還原形成紫色甲臜染料。該物質(zhì)還可用于脫氫酶的檢測，生化研究中酶活力的測定。。此外，它在測定NADH2、NADPH2和心肌黃酶(Diaphorase)的生物活性中也有一定的應(yīng)用。噻唑藍的檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO )能溶解細胞中的甲瓚，用酶標(biāo)儀在490nm或570nm波長處測定其光吸收值，在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶溶解所致的吸光度值與細胞數(shù)量成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細胞數(shù)量，OD值越大，細胞數(shù)量越多或活性越強(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。經(jīng)驗心得，MTT實驗最終吸光度應(yīng)當(dāng)落于0.8~1.2左右，太小檢測誤差占的比例較多，太大吸收值可能已經(jīng)超出線性范圍。[1]

參考文獻

[1] 陳哲生,孫明杰.噻唑藍比色法用來研究人淋巴細胞和小鼠巨噬. [J].現(xiàn)代免疫學(xué), 1992(5):269-271.