背景技術(shù)：
現(xiàn)有的三磷酸腺苷二鈉(ATP-Na2)的生產(chǎn)方法，操作復(fù)雜，生產(chǎn)成本高，使用溶劑甲苯、廢棄的酵母不能得到充分利用，環(huán)境污染大，且產(chǎn)品轉(zhuǎn)化率低收率低。
發(fā)明內(nèi)容：
本發(fā)明的目的在于提供一種產(chǎn)品轉(zhuǎn)化率高，ATP收率高的三磷酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：
一種三磷酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法，其特征是：包括下列步驟：
(1)先加自來水于反應(yīng)鍋中，同時開動攪拌，用夾套加熱至43～45℃，然后投放蔗糖、葡萄糖、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀，使其溶解，停止加熱，用循環(huán)水降溫，當(dāng)溫度降至40-42℃以下時，投放酵母泥，并用夾套加熱緩慢升溫；
(2)用二倍于硫酸鎂體積的自來水溶解硫酸鎂，另外用水∶腺苷液＝12∶1的比例先將自來水加熱至80℃，將腺苷溶解；
(3)當(dāng)反應(yīng)鍋內(nèi)溫度至25℃±1℃時，依次投放硫酸鎂、腺苷液，并將反應(yīng)料液加熱至38-40℃，停止加熱，保溫2h，此時開始取樣測定腺苷的轉(zhuǎn)達(dá)化率，當(dāng)反應(yīng)達(dá)到三磷酸腺苷二鈉一條帶時，反應(yīng)結(jié)束；
(4)滅活、調(diào)酸堿
反應(yīng)結(jié)束立即放掉夾套中熱水，一邊通冷卻水降溫，一邊投放冰于反應(yīng)鍋中，降溫至6-8℃時停止加冰，用磷酸調(diào)節(jié)pH3.0～4.0，靜置1小時后，再調(diào)節(jié)pH6.5～7.5，再靜置30分鐘后開始壓榨，當(dāng)反應(yīng)液壓榨結(jié)束后，再用純化水頂洗濾餅，30分鐘后，取水頂液檢測，當(dāng)三磷酸腺苷二鈉濃度≤0.1％時即停止水頂，然后將水頂液與壓榨液混勻，檢驗三磷酸腺苷二鈉濃度0.5～1％、透光度≥90％方為合格，將混合液送分離工段處理；
(5)樹脂分離
上樣：將上述混合液加純凈水稀釋至0.3～0.5％上樹脂柱，上樣8小時后每2小時檢測流出液中ATP濃度，當(dāng)上樣流出液中ATP≥0.1％時停止上樣，改水頂，2小時后再進(jìn)行上樣，直到上樣結(jié)束；
水洗雜質(zhì)：上樣結(jié)束，用純化水正進(jìn)洗滌至流出液A257≤0.5；然后反進(jìn)水洗至樹脂上層無混濁機(jī)械雜質(zhì)且流出液A257≤0.5結(jié)束；
稀鹽洗雜質(zhì)：水洗結(jié)束，用0.05％稀氯化鈉溶液反進(jìn)流洗，每2小時取樣，測流出液中ATP濃度，當(dāng)流出液中ATP濃度≥0.1％時，反進(jìn)流洗雜質(zhì)結(jié)束，改正進(jìn)，每2小時取樣，測流出液中ATP濃度，若濃度≥0.5％時，開始洗脫；
洗脫：當(dāng)液位降至樹脂上沿20cm處時，用2％濃鹽液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，結(jié)束后送至脫色；
(6)脫色：洗脫液先用二十萬分子量的中空纖維超濾膜進(jìn)行次超濾去蛋白，再添加活性炭，攪拌30分鐘以上后靜置30分鐘，然后將脫色液送至精密過濾器超濾除熱原；
(7)超濾、結(jié)晶
超濾：將脫色液再用納膜式超濾器進(jìn)行第二次超濾除熱原，再送去結(jié)晶；
結(jié)晶：超濾液先用3N鹽酸調(diào)節(jié)pH至5.0，然后用夾套熱水升溫至30～32℃，同時開始攪拌，溫度達(dá)到32℃，開始加入95％乙醇，并保持溫度30-32℃，當(dāng)鍋內(nèi)出現(xiàn)白色混濁時，停止加乙醇，繼續(xù)攪拌半小時，然后開夾套冷卻，將料液冷卻至室溫；
離心結(jié)晶液，濕品先用乙醇淋洗，再用無水乙醇浸泡，最后離心30分鐘甩干，將濕品放入濕品存入室中，母液送蒸餾回收崗位進(jìn)行回收；
將濕品均勻地鋪入盤中，放入烘箱內(nèi)，真空干燥溫度控制在38～42℃，16小時后取出將其搗碎，而后每5小時翻料1次，待濕品烘至40小時后，取樣品送分析室測快速失重，當(dāng)快速失重＜5％，即可出料；將干品放入干品存放室中保存，得產(chǎn)品。
各反應(yīng)物的用量按重量份計為：
腺苷 38～40份 酵母泥 400～450份
蔗糖 110～120份 葡萄糖 70～80份
磷酸二氫鉀 35～40份 磷酸氫二鉀 220～230份
硫酸鎂 15～25份。
步驟(6)中脫色時，活性炭的使用量為超濾液量的0.5％。
本發(fā)明采用氧化磷酸化方法，生化反應(yīng)過程中去除溶劑甲苯，用硫酸鎂來激活酵母細(xì)胞中的酶系，使產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化率達(dá)到100％，ATP的收率達(dá)到150％以上；充分利用啤酒生產(chǎn)廢棄的酵母經(jīng)二次發(fā)酵生產(chǎn)三磷酸腺苷二鈉，以生產(chǎn)三磷酸腺苷二鈉廢氣的酵母，再利用生產(chǎn)維生素D2的前驅(qū)體麥角甾醇，有效地減輕了環(huán)境污染。本發(fā)明工藝便于工業(yè)化大生產(chǎn)，操作簡便、安全；生化過程中未使用溶劑甲苯，使得廢棄的酵母得到充分利用，減少了對環(huán)境的污染，保障了操作工的身體健康。
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
具體實施方式：
一種三磷酸腺苷二鈉的生產(chǎn)方法，包括下列步驟：
(1)先加自來水于反應(yīng)鍋中，同時開動攪拌，用夾套加熱至43～45℃，然后投放蔗糖、葡萄糖、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀，使其溶解，停止加熱，用循環(huán)水降溫，當(dāng)溫度降至40-42℃以下時，投放酵母泥，并用夾套加熱緩慢升溫。
(2)用二倍于硫酸鎂體積的自來水溶解硫酸鎂，另外用水∶腺苷液＝12∶1的比例先將自來水加熱至80℃，將腺苷溶解。
(3)當(dāng)反應(yīng)鍋內(nèi)溫度至25℃±1℃時，依次投放硫酸鎂、腺苷液。并將反應(yīng)料液加熱至38-40℃，停止加熱，保溫2h，此時開始取樣測定腺苷的轉(zhuǎn)達(dá)化率，此時氣泡如過多，可加適量泡敵消泡，當(dāng)反應(yīng)達(dá)到三磷酸腺苷二鈉一條帶時，反應(yīng)結(jié)束。
(4)滅活、調(diào)酸堿
反應(yīng)結(jié)束立即放掉夾套中熱水，一邊通冷卻水降溫，一邊投放冰于反應(yīng)鍋中，降溫至6-8℃時停止加冰。用磷酸調(diào)節(jié)pH3.0～4.0，靜置1小時后，再調(diào)節(jié)pH6.5～7.5，再靜置30分鐘后開始壓榨。當(dāng)反應(yīng)液壓榨結(jié)束后，再用純化水頂洗濾餅，30分鐘后，取水頂液檢測，當(dāng)三磷酸腺苷二鈉濃度≤0.1％時即停止水頂。然后將水頂液與壓榨液混勻，檢驗三磷酸腺苷二鈉濃度0.5～1％、透光度≥90％方為合格，將混合液送分離式段處理。
(5)樹脂分離
上樣
將上述混合液加純凈水稀釋至0.3～0.5％上樹脂柱，上樣8小時后每2小時檢測流出液中ATP濃度，當(dāng)上樣流中ATP濃度，當(dāng)上樣流出液中ATP≥0.1％時停止上樣，改水頂，2小時后再進(jìn)行上樣，直到上樣結(jié)束。
水洗雜質(zhì)
上樣結(jié)束，用純化水正進(jìn)洗滌至流出液A257≤0.5；然后反進(jìn)水洗至樹脂上層無混濁機(jī)械雜質(zhì)且流出液A257≤0.5結(jié)束。
稀鹽洗雜質(zhì)
水洗結(jié)束，用0.05％稀鹽溶液反進(jìn)流洗，每2小時取樣，測流出液中ATP濃度，當(dāng)流出液中ATP濃度≥0.1％時，反進(jìn)流洗雜質(zhì)結(jié)束。改正進(jìn)，每2小時取樣，測流出液中ATP濃度，若濃度≥0.5％時，開始洗脫
洗脫
當(dāng)液位降至樹脂上沿20cm處時，用2％濃鹽液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，結(jié)束后送至脫色。
(6)脫色
洗脫液先用二十萬分子量的中空纖維超濾膜進(jìn)行次超濾去蛋白，再根據(jù)超濾液的量添加活性炭，活性炭的使用量為超濾液量的0.5％，攪拌30分鐘以上后靜置30分鐘，然后將脫色液送至精密過濾器超濾除熱原。
(7)超濾、結(jié)晶
超濾
將脫色液再用納膜式超濾器進(jìn)行第二次超濾除熱原，經(jīng)檢驗合格后送去結(jié)晶。
結(jié)晶
超濾液先用3N鹽酸調(diào)節(jié)pH至5.0，然后用夾套熱水升溫至30~32℃，同時開始攪拌。溫度達(dá)到32℃，開始加入95％乙醇，并保持溫度30-32℃。當(dāng)鍋內(nèi)出現(xiàn)白色混濁時，停止加乙醇，繼續(xù)攪拌半小時，然后開夾套冷卻，將料液冷卻至室溫。
離心結(jié)晶液，濕品先用乙醇淋洗，再用無水乙醇浸泡，最后離心30分鐘甩干，將濕品裝入塑料袋中請驗，將濕品放入濕品存入室中，母液送蒸餾回收崗位進(jìn)行回收。
將濕品均勻地鋪入盤中，放入烘箱內(nèi)，真空干燥溫度控制在40℃左右，16小時后取出將其搗碎，而后每5小時翻料1次，待濕品烘至40小時后，取樣品送分析室測快速失重，當(dāng)快速失重＜5％，即可出料。將同一批號的干品放入塑料袋中，同時請驗，將干品放入干品存放室中保存。
包裝
按包裝指令單將干品放入三維混合機(jī)中混合，然后定量進(jìn)行包裝。并請檢，合格后入庫。
上述各反應(yīng)物的用量按重量份計為：
腺苷38～40份(例38、40、42份)、酵母泥400～450份(例400、420、450份)、蔗糖110～120份(例110、115、120份)、葡萄糖70～80份(例70、75、80份)、磷酸二氫鉀35～40份(例35、38、40份)、磷酸氫二鉀220～230份(例220、225、230份)、硫酸鎂15～25份(例15、20、25份)。