由于視黃醛的藥用價(jià)值,微生物合成生物基視黃醛的需求越來越大。但目前利用微生物法合成維生素A的研究中,得到的產(chǎn)品中包含視黃醛、視黃醇和視黃酸三者的混合物,產(chǎn)物結(jié)構(gòu)和性質(zhì)比較接近,使下游分離純化成本上升。
釀酒酵母中含有超過30種氧化還原酶,通過將醇脫氫酶(Adh6, Adh7, Sfa1和Gre2)和一個(gè)醛脫氫酶(Hfd1)的聯(lián)合失活實(shí)現(xiàn)了視黃醛在釀酒酵母中的積累。采用組合方法優(yōu)化甲羥戊酸(mevalnate,MVA)途徑,該酵母底盤細(xì)胞的基礎(chǔ)上異源表達(dá)了來自紅發(fā)夫酵母的CrtE/YB/I,改善酵母中的 β-胡蘿卜素合成。此外進(jìn)一步整合來自海洋細(xì)菌66A03的BCMO,通過整合來自解酯酵母的ATP依賴檸檬酸裂解酶ACL將檸檬酸轉(zhuǎn)化為細(xì)胞胞質(zhì)中的乙酰輔酶A,從而獲得高產(chǎn)視黃醛的釀酒酵母工程改造菌株。在搖瓶中獲得了69.13±5.82 mg L?1視黃醛(>99%純度)。