Recombinant Rat SDF-1β預(yù)防 Pal 誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的劑量效應(yīng) ^[1]

在 Pal 處理細(xì)胞前，先用不同劑量 SDF-1β（25 nM、50 nM、100 nM）預(yù)處理 1 h，然后用 SDF-1β 和 Pal 共同處理 15 h，分別用 western-blot 和細(xì)胞死亡 ELISA 的方法檢測 c-caspase3 變化和 DNA 鏈斷裂的情況。Western-blot 結(jié)果顯示，25 nM 和 50 nM 的 Recombinant Rat SDF-1β有降低 c-caspase3 的趨勢，但未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，100  nM 的 SDF-1β 能夠顯著降低 c-caspase3 的表達(dá)（圖 3.2.1.1A）。細(xì)胞死亡ELISA 結(jié)果顯示，25 nM 的 SDF-1β 對 Pal 誘導(dǎo)的 DNA 鏈斷裂損傷沒有影響，50 nM 時即可看到保護(hù)性效應(yīng)，與 Pal 組比較具有顯著性差異，100 nM 時，保護(hù)性效應(yīng)更加明顯（圖 3.2.1.1B）。在 15  h 時，單獨(dú) 100  nM 的 SDF-1β 處理組與對照組相比，凋亡細(xì)胞更少（圖 3.2.1.1C），這說明 SDF-1β 不但可以預(yù)防 Pal引起的心肌細(xì)胞凋亡，而且其對正常培養(yǎng)的心肌細(xì)胞也具有抗凋亡效應(yīng)。

Recombinant Rat SDF-1β能夠?qū)al誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞硝化損傷、ERS和細(xì)胞凋亡具有顯著的保護(hù)作用，這種保護(hù)作用是通過激活A(yù)MPK和p38 MAPK后促進(jìn)IL-6生成而實(shí)現(xiàn)的。

SDF-1β能夠顯著提高Akt和ERK1/2的磷酸化水平，然而這兩個信號通路的激活卻不參與SDF-1β預(yù)防Pal誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的作用，因?yàn)镻I3K抑制劑LY294002和ERK1/2抑制劑U0126并不能阻滯Recombinant Rat SDF-1β的抗凋亡效應(yīng)。與以往的研究形成對比，證實(shí)心肌細(xì)胞經(jīng)Recombinant Rat SDF-1β處理6  h后，p38 MAPK的磷酸化水平顯著升高，而Pal對p38  MAPK的磷酸化并無影響。應(yīng)用p38 MAPK抑制劑SB203580（對p38α和β無選擇性）或p38β MAPK特異性si RNA能夠完全抑制Pal誘導(dǎo)的ERS和細(xì)胞凋亡，表明SDF-1β保護(hù)Pal誘導(dǎo)的ERS依賴的心肌細(xì)胞凋亡的效應(yīng)是通過p38β MAPK實(shí)現(xiàn)的。

研究闡明：Recombinant Rat SDF-1β對Pal誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡具有預(yù)防保護(hù)作用，主要有以下幾項(xiàng)主要發(fā)現(xiàn)：

①Pal能夠誘導(dǎo)H9c2細(xì)胞的硝化損傷、ERS和凋亡；

②Recombinant Rat SDF-1β的心肌保護(hù)作用是通過與其細(xì)胞表面的另一受體CXCR7結(jié)合，繼而激活A(yù)MPK和p38β MAPK，促進(jìn)IL-6生成來實(shí)現(xiàn)的。

這些發(fā)現(xiàn)為理解SDF-1β心臟保護(hù)作用的機(jī)制提供了新的視角，即除了具有促進(jìn)血管新生的作用，同時還有抗心肌細(xì)胞凋亡的作用。

參考文獻(xiàn)

[1]基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1對高脂誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的預(yù)防作用及機(jī)制