背景^[1][2]

單克隆抗體技術(shù)起源于Kohler等創(chuàng)建的體外鼠源雜交瘤技術(shù)。經(jīng)多年研究，鼠單抗已從單純的生物實(shí)驗(yàn)室科研及臨床診斷發(fā)展到治療性抗體藥物。但鼠單抗的主要缺陷是小鼠免疫系統(tǒng)不能識別某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠單抗的親和性不如兔來源抗體的親和性高。然而由于沒有發(fā)現(xiàn)兔源性的漿細(xì)胞瘤及病毒體外轉(zhuǎn)染兔B細(xì)胞的技術(shù)困難，直到1995年在c-myc/v-abl轉(zhuǎn)基因兔身上成功地獲得了兔漿細(xì)胞瘤細(xì)胞系，得到了穩(wěn)定的兔-兔雜交瘤，才使兔單克隆抗體技術(shù)有了突破性進(jìn)展。

近年兔單克隆抗體技術(shù)日臻完善，目前商品化的兔單抗已達(dá)數(shù)千種。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(signal transducers andactivators of transcription 5，STAT5)是一類能與磷酸化的酪氨酸結(jié)合的Src 同源區(qū)2(SH2)的蛋白質(zhì)分子，廣泛參與細(xì)胞的增殖和分化，調(diào)節(jié)細(xì)胞的凋亡，并與白血病、自身免疫性疾病及乳腺癌等多種疾病的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后密切相關(guān)，是近年來乳腺癌研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。

STAT5 包括由不同基因編碼的5a和5b兩個亞型，分別含有794 和786 個氨基酸。5a和5b的相對分子質(zhì)量(Mr)分別為95 000 和90 000～92 000，其編碼基因均位于人類染色體17q11 .2，兩者的同源性為96 %。STAT5 參與許多細(xì)胞因子、激素和生長因子的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，在調(diào)控造血細(xì)胞和淋巴細(xì)胞系的增殖、分化和凋亡中起重要作用。

磷酸化STAT5（Tyr694）兔單克隆抗體可用于免疫印跡，免疫組化，免疫細(xì)胞化學(xué)，免疫沉淀，流式細(xì)胞儀，免疫組化-石蠟切片等，反應(yīng)物種可為人類，小鼠，大鼠，牛。磷酸化STAT5（Tyr694）兔單克隆抗體于 -20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western-抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。

如果磷酸化STAT5（Tyr694）兔單克隆抗體用于Western blot (WB)、免疫熒光(IF)、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)等實(shí)驗(yàn)，請注意回收使用過的稀釋抗體?；厥盏目贵w通常至少可以重復(fù)使用5-10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，請4℃保存。回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。

主要參考資料

[1] 李婷婷，崔慧斐. 兔單克隆抗體的發(fā)展及應(yīng)用前景[J]. 食品與藥品，2012，14(9): 373-376.

[2] 陳晶，單保恩，陳興，等. 兔抗 STAT5 抗體的制備及其在乳腺癌診斷中的應(yīng)用[D]. ，2004.