背景^[1][2]

熱休克蛋白（heat shock protein，HSP）是在各種應(yīng)激因素特別是高溫環(huán)境因素的誘導(dǎo)下產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì)，HSPs-肽復(fù)合物通過活化體內(nèi)多個CTL 克隆，可望特異殺傷同一種腫瘤內(nèi)所有腫瘤細(xì)胞，打破免疫耐受，消滅殘存瘤組織，克服目前腫瘤中難以解決的抗原多變性及細(xì)胞異質(zhì)性等困難。根據(jù)其分子量的不同，可分為HSP110，HSP90，HSP70，HSP60 及小分子熱休克蛋白亞家族。

CDC37作為熱休克蛋白90(HSP90)的一種重要的輔助分子伴侶能夠特異性地與蛋白激酶結(jié)合，防止新合成的蛋白激酶的錯誤折疊和降解。研究發(fā)現(xiàn)，CDC37在活躍增殖的組織中的表達(dá)水平明顯高于正常組織，而且CDC37的過表達(dá)能夠促進(jìn)正常前列腺上皮細(xì)胞增殖。

CDC37在肝癌組織中的表達(dá)明顯高于癌周組織和正常肝組織，肝癌細(xì)胞系中CDC37基因表達(dá)的沉默會明顯抑制其在裸鼠中腫瘤模型的形成和生長，在肝癌的形成過程中CDC37的高表達(dá)能夠弱化P16對細(xì)胞生長的抑制 ，提示CDC37表達(dá)的上調(diào)在HCC發(fā)生過程具有重要作用。單克隆抗體技術(shù)起源于Kohler等創(chuàng)建的體外鼠源雜交瘤技術(shù)。

經(jīng)多年研究，鼠單抗已從單純的生物實驗室科研及臨床診斷發(fā)展到治療性抗體藥物。但鼠單抗的主要缺陷是小鼠免疫系統(tǒng)不能識別某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠單抗的親和性不如兔來源抗體的親和性高。然而由于沒有發(fā)現(xiàn)兔源性的漿細(xì)胞瘤及病毒體外轉(zhuǎn)染兔B細(xì)胞的技術(shù)困難，直到1995年在c-myc/v-abl轉(zhuǎn)基因兔身上成功地獲得了兔漿細(xì)胞瘤細(xì)胞系，得到了穩(wěn)定的兔-兔雜交瘤，才使兔單克隆抗體技術(shù)有了突破性進(jìn)展。近年兔單克隆抗體技術(shù)日臻完善，目前商品化的兔單抗已達(dá)數(shù)千種。

磷酸化CDC37 (Ser13)兔單克隆抗體-20℃保存，Western一抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。 

如果磷酸化CDC37 (Ser13)兔單克隆抗體用于Western blot (WB，1:1000 - 1:10000)、免疫熒光(IF)、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC，1:10 - 1:100)、Flo (1:10 - 1:100)，IHC-P (1:250 - 1:500)，IP (1:10 - 1:100)，IHC - Paraffin (1:250 - 1:500)，F(xiàn)low Cytome try (1:10- 1:100)等實驗，請注意回收使用過的稀釋抗體?；厥盏牧姿峄疌DC37 (Ser13)兔單克隆抗體通常至少可以重復(fù)使用5-10次。

稀釋后的磷酸化CDC37 (Ser13)兔單克隆抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，請4℃保存。 回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測。如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長霉長菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。 

主要參考資料

[1] 李婷婷，崔慧斐. 兔單克隆抗體的發(fā)展及應(yīng)用前景[J]. 食品與藥品，2012，14(9): 373-376.

[2] HBV復(fù)制及不同基因表達(dá)不影響CDC37水平