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蠟樣芽孢桿菌-生物殺菌劑

2021/8/31 15:54:50

蠟樣芽孢桿菌(學(xué)名:Bacillus cereus),又稱(chēng)仙人掌桿菌,是一種革蘭氏陽(yáng)性菌,β溶血性的桿狀細(xì)菌 。經(jīng)常在土壤和食物中被發(fā)現(xiàn),有些菌株會(huì)引起食物中毒,例如"炒飯綜合癥"(Fried Rice Syndrome);另外一些菌株則對(duì)其他動(dòng)物有益。蠟樣芽孢桿菌是兼性厭氧性。與其他芽孢桿菌相同,它會(huì)產(chǎn)生防御性的內(nèi)芽孢。它的致病因子包括施普善(cereolysin)和磷脂酶C(Phospholipase C)。

1、形態(tài)特征

芽胞桿菌屬(Bacillus)中的一種。菌體細(xì)胞桿狀,末端方,成短或長(zhǎng)鏈,1.0~1.2×3.0~5.0微米。產(chǎn)芽孢,芽孢圓形或柱形,中生或近中生,1.0~1.5微米,孢囊無(wú)明顯膨大。革蘭氏陽(yáng)性,無(wú)莢膜,運(yùn)動(dòng)。菌落大,表面粗糙,扁平,不規(guī)則。菌落形態(tài):在普通瓊脂平板培養(yǎng)基上,37 ℃,培養(yǎng)24 h,可形成圓形或近似圓形、質(zhì)地軟、無(wú)色素、稍有光澤的白色菌落(似蠟燭樣顏色)直徑5-7 mm.在M.S.P 培養(yǎng)基上生長(zhǎng)更旺盛,菌落直徑達(dá)8-10 mm,質(zhì)地更軟,挑起來(lái)呈絲狀,培養(yǎng)時(shí)間稍長(zhǎng),菌落表面呈毛玻璃狀,并產(chǎn)生紅色色素。在蛋白胨酵母膏平板上菌落為灰白色,不透明,表面較粗糙,似毛玻璃狀或融蠟狀,菌落較大。蠟狀芽胞桿菌細(xì)菌對(duì)外界有害因子抵抗力強(qiáng),分布廣,是典型的菌體細(xì)胞,有部分菌株能產(chǎn)生腸毒素,呈桿狀(約1.5μm),有色,孢子呈橢圓形,有致嘔吐型和腹瀉型胃腸炎腸毒素兩類(lèi)。

2、生態(tài)習(xí)性

兼性好氧。生長(zhǎng)溫度范圍20~45℃,10℃以下生長(zhǎng)緩慢或不生長(zhǎng)。存在于土壤、水、空氣以及動(dòng)物腸道等處。在葡萄糖肉湯中厭氧培養(yǎng)產(chǎn)酸,從阿拉伯糖、甘露醇、木糖不產(chǎn)酸,分解碳水化合物不產(chǎn)氣。大多數(shù)菌株還原硝酸鹽,50℃時(shí)不生長(zhǎng)。在100℃下加熱20min可破壞這類(lèi)菌。

3、經(jīng)濟(jì)用途

與人類(lèi)關(guān)系密切是引起食物中毒,中毒者癥狀為腹痛、嘔吐腹瀉。蠟狀芽胞桿菌可產(chǎn)生抗菌物質(zhì),抑制有害微生物的繁殖,降解土壤中的營(yíng)養(yǎng)成分,改善生態(tài)環(huán)境。可產(chǎn)生細(xì)菌蛋白酶;可用于麻脫膠,是各種抗生素抗菌活性的測(cè)定菌??捎糜诿髂z液化,牛奶胨化,還原硝酸鹽,水解淀粉。

4、病癥

蠟樣芽胞桿菌與少數(shù)食物中毒有關(guān)(約2–5%),包括一些嚴(yán)重的惡心、嘔吐以及腹痛。大概來(lái)說(shuō),桿菌性食物中毒是由于錯(cuò)誤地烹調(diào)方法造成細(xì)菌孢子殘留在食物上,更糟糕的是食物被不當(dāng)冷凍而讓孢子發(fā)芽。細(xì)菌繁殖的結(jié)果是產(chǎn)生腸毒素,人食用含毒素的食物后會(huì)產(chǎn)生嘔吐、腹瀉等不良癥狀。

許多食物都有可能造成這種腹瀉,它有8–16個(gè)小時(shí)的潛伏期,之后便會(huì)引發(fā)腹瀉和腸胃疼痛。而另一種潛伏期長(zhǎng)的蠟樣芽胞桿菌食物中毒,與產(chǎn)氣莢膜梭菌所造成的病癥極其相似。

吃了冷藏不當(dāng)而變質(zhì)的剩飯是造成嘔吐病癥的最主要的原因。食用變質(zhì)食物后1–5小時(shí)就會(huì)引起惡心、嘔吐。這種病癥與其他的變質(zhì)引起的短期病癥(如金黃色葡萄球菌所造成的)較難辨別。

以前人們認(rèn)為有毒物質(zhì)產(chǎn)生效果的時(shí)間與以上兩種類(lèi)型有關(guān),但事實(shí)上嘔吐綜合癥是因一種只在引起嘔吐的類(lèi)型中發(fā)現(xiàn)的名為cereulide的毒素造成的,并且該產(chǎn)物不是蠟樣芽胞桿菌的標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)物之一。Cereulide是一種由非核糖調(diào)控縮氨酸綜合(NRPS)產(chǎn)生的即使在菌體內(nèi)也是不常見(jiàn)的dodecadepsipeptide。兩個(gè)科研小組獨(dú)立發(fā)現(xiàn)這種轉(zhuǎn)錄是發(fā)生在pCERE01或是pBCE4810質(zhì)體上。有趣的是,該種質(zhì)體與有毒的pXO1質(zhì)體主要構(gòu)成相同,pXO1是炭疽桿菌中編碼毒素的基因,但卻處在不同的致病島上。蠟樣芽胞桿菌的牙周分離同樣具有不常見(jiàn)的類(lèi)pXO1質(zhì)體。

5、發(fā)現(xiàn)

1950年首次在挪威報(bào)告,以后類(lèi)似的食物中毒在許多國(guó)家都有報(bào)告。蠟樣芽抱桿菌食物中毒有明顯的季節(jié)性,通常以夏、秋季最高(6-10月份),引起中毒的食品常于食前保存溫度不當(dāng)(26~37℃)放置時(shí)間較長(zhǎng),使食品中污染的蠟樣芽抱桿菌得以生長(zhǎng)繁殖,產(chǎn)生毒素引起中毒。

蠟樣芽抱桿菌食物中毒的診斷,很多是根據(jù)流行病學(xué)線(xiàn)索,中毒食品檢出大量的蠟樣芽飽桿菌>105/克作為食物中毒的判斷依據(jù)。食品中污染蠟樣芽抱在室溫內(nèi)(16一40℃)即易繁殖產(chǎn)生腸毒素,故肉類(lèi)、奶類(lèi)及剩飯等熟食品只能在低溫短期時(shí)間存放。剩飯等熟食品只能在低溫短期時(shí)間存放。剩飯等熟食品即使在食用前加熱煮沸,蠟樣芽抱菌的芽抱也不易死亡。

6、鑒定方法

常規(guī)分離鑒定技術(shù)中檢樣處理、增菌及分離培養(yǎng)鑒定按GB/T4789.14一2003的方法進(jìn)行。

蠟樣芽孢桿菌的檢測(cè)方法

國(guó)內(nèi)外對(duì)于蠟樣芽抱桿菌的檢測(cè)方法有常規(guī)的檢測(cè)方法;基于PCR技術(shù)、酶反應(yīng)、免疫學(xué)技術(shù)的快速檢測(cè)方法。

常規(guī)檢測(cè)方法是將分離培養(yǎng)后的可疑菌落做生化試驗(yàn)、溶血試驗(yàn)、協(xié)同溶血試驗(yàn)、動(dòng)物試驗(yàn)、典型運(yùn)動(dòng)等鑒定,被確定為蠟樣芽孢桿菌后進(jìn)一步進(jìn)行血清分型。常規(guī)檢驗(yàn)步驟為:樣品→增菌→分離培養(yǎng)(并作菌數(shù)測(cè)定)、分離純化→革蘭染色鏡檢/生化及菌落觀察/生化反應(yīng)試驗(yàn)→腸毒素檢查。

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