背景[1-3]
動(dòng)力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MIU)用于細(xì)菌的復(fù)合生化試驗(yàn)，成分(g/950ml)：胰酪蛋白胨10.0；磷酸氫二鉀2.0；氯化鈉5.0；瓊脂4.0；酚紅0.012；葡萄糖1.0；pH值7.0±0.1，25℃。
尿素酶試驗(yàn)原理：
有些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶，將尿素分解、產(chǎn)生2個(gè)分子的氨，使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，酚紅呈粉紅色。尿素酶不是誘導(dǎo)酶，因?yàn)椴徽摰孜锬蛩厥欠翊嬖?，?xì)菌均能合成此酶。其活性最適ph為7.0。
用法：稱取本品2.2g,加熱煮沸溶解于95ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃左右時(shí),無菌加入40%的尿素溶液5ml,混勻,分裝試管備用。
動(dòng)力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MIU)為含尿素、蛋白胨成分的半固體培養(yǎng)基，指示劑為酚紅。具有色氨酸酶的細(xì)菌能分解蛋白胨中的色氨酸產(chǎn)生吲哚，加入吲哚試劑后，培養(yǎng)基與吲哚試劑的界面會(huì)變紅；具有尿素酶的細(xì)菌能分解尿素產(chǎn)生氨，使整個(gè)培養(yǎng)基變堿呈紅色；有動(dòng)力的細(xì)菌沿穿刺線擴(kuò)散生長(zhǎng)。
動(dòng)力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MIU)
將大腸埃希氏菌和普通變形桿菌穿刺接種于MIU培養(yǎng)基，35℃培養(yǎng)18h~24h，觀察動(dòng)力和尿素酶反應(yīng)后，再滴加吲哚試劑。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：大腸埃希氏菌動(dòng)力陽性，吲哚陽性，尿素酶陰性；普通變形桿菌動(dòng)力陽性，吲哚陽性，尿素酶陽性。
應(yīng)用[4][5]
用于一種耐藥變形桿菌的分離、鑒定及其免疫學(xué)效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究
選擇乙肝病人外周血中樹突細(xì)胞信號(hào)分子表達(dá)、細(xì)胞因子分泌，以及小鼠脾細(xì)胞增殖、脾細(xì)胞分泌細(xì)胞因子等體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)，探討變形桿菌對(duì)樹突細(xì)胞信號(hào)分子的表達(dá)和細(xì)胞免疫、體液免疫的影響，為變形桿菌應(yīng)用于菌苗奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。目的本研究采用腸道菌選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基分離泌尿系統(tǒng)反復(fù)感染患者的尿液樣本中的變形桿菌，經(jīng)進(jìn)一步鑒定和傳代減毒后感染小鼠，分析脾細(xì)胞體外增殖能力和脾細(xì)胞分泌IL-2、IFN-γ水平及抗體變化；并通過流式細(xì)胞儀、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)分析乙肝病人外周血樹突細(xì)胞信號(hào)分子表達(dá)和IFN-γ水平變化，探討變形桿菌對(duì)細(xì)胞免疫和體液免疫的影響，為變形桿菌菌苗研究奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
方法1．留取泌尿系統(tǒng)反復(fù)感染患者的尿液樣本，將所取樣品用分區(qū)劃線法分別接種于腸道菌選擇培養(yǎng)基（S，S瓊脂）及鑒別培養(yǎng)基（伊紅美藍(lán)瓊脂）平皿中，置37℃溫箱培養(yǎng)18～24小時(shí)后，觀察菌落特征，在培養(yǎng)后的平皿中找到符合變形桿菌菌落特點(diǎn)的菌落。將挑出的菌落做進(jìn)一步的鑒定。
2．用Blendon鍍銀染色后觀察、三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基試驗(yàn)、動(dòng)力靛基質(zhì)尿素酶試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)對(duì)挑出的菌落作初步鑒定。
3．從泌尿系統(tǒng)反復(fù)感染患者的尿液樣本中分離的變形桿菌通過特殊的處理，將原有的毒性減低，并做毒性試驗(yàn)以證明其毒性的降低。再用三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基試驗(yàn)、動(dòng)力靛基質(zhì)尿素酶試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、遷徙生長(zhǎng)試驗(yàn)、硫化氫產(chǎn)生試驗(yàn)、液化明膠試驗(yàn)、西蒙枸櫞酸鹽試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、氨基酸脫羧酶試驗(yàn)、糖（醇、苷）類發(fā)酵試驗(yàn)（麥芽糖、木糖）、對(duì)氯霉素的敏感性試驗(yàn)對(duì)特殊處理后的菌種進(jìn)行最后鑒定。鑒定無誤后將經(jīng)特殊處理的菌種接種、培養(yǎng)、采集、殺菌、離心、純化，稀釋成2×1011／mL的原液，并對(duì)原液進(jìn)行無菌試驗(yàn)和原液檢定。
參考文獻(xiàn)
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[5]王鵬.一種耐藥變形桿菌的分離、鑒定及其免疫學(xué)效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D].軍醫(yī)大學(xué),2007.