背景及概述^[1]

(3Z,6Z)-3-[(5-叔丁基-1H-咪唑-4-基)亞甲基]-6-(苯亞甲基)-2,5-哌嗪二酮又稱為Plinabulin(KPU-2，NPI-2358)，由美國(guó)Nereus制藥公司研制，是源自海洋曲霉菌的低分子環(huán)二肽phenylahistin或halimide的合成衍生物，是一種微管蛋白結(jié)合劑。Plinabulin可結(jié)合到微管蛋白的秋水仙素結(jié)合位點(diǎn)附近，作用于細(xì)胞，使細(xì)胞停在有絲分裂早期，而誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。同時(shí)，它也抑制微管形成，及內(nèi)皮細(xì)胞和MM細(xì)胞的遷移，使腫瘤脈管系統(tǒng)功能失常。

制備^[1]

1)5-(叔丁基)噁唑-4-甲酸乙酯的制備

將90g(796mmol)異氰基乙酸乙酯加入到1000mL四氫呋喃,緩慢滴加145g(955mmol)DBU，然后滴加178g(955mmol)三甲基乙酸酐，滴畢室溫下攪拌反應(yīng)48h。反應(yīng)畢，減壓濃縮。萃取，加適量1500mL二氯甲烷，依次用800mL10％碳酸鈉、800mL10％檸檬酸、800mL飽和食鹽水洗，1000mL二氯甲烷反萃水相兩次。合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，半小時(shí)后抽濾，減壓濃縮。過硅膠(200～300目)柱(EA:PE＝1:10、1:8、1:5)，得黃色液體177g為所述5-(叔丁基)噁唑-4-甲酸乙酯，收率113％。

2)5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-甲酸乙酯的制備

將157g(796mmol)5-(叔丁基)-1H-噁唑-4-甲酸乙酯加到717g(15.914mmol)甲酰胺，油浴180℃攪拌回流反應(yīng)30h。冷卻到室溫，萃取，加入800mL10％碳酸鈉，加入500mL石油醚萃取并棄掉有機(jī)層，再用乙酸乙酯(1000mL*3)萃取三次，合并有機(jī)相并用飽和食鹽水(800mL*2)洗兩次，水相用乙酸乙酯(500mL*2)反萃兩次，合并有機(jī)相無水硫酸鈉干燥。抽濾，減壓濃縮。打漿，加入1000mL水?dāng)嚢?，抽濾，濾餅水洗，50℃真空干燥。得土黃色固體71g為所述5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-甲酸乙酯，收率45％。

3)5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-甲醇的制備

在-10℃冷肼中，將40g(1054mmol)氫化鋁鋰加到干燥的300mL四氫呋喃中，將用200mL四氫呋喃溶解的70g(357mmol)5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-甲酸乙酯緩慢滴加到氫化鋁鋰的混濁液中，滴畢移至室溫下攪拌反應(yīng)3h。冰水淬滅反應(yīng)，用量杯量取適量的冰，將反應(yīng)液逐滴滴入。抽濾，濾餅依次用水(1000mL*2)洗兩次、四氫呋喃(500mL*2)洗兩次，無水乙醇(500mL*2)洗兩次，減壓濃縮，無水乙醇帶水。得淡黃色固體51g為所述5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-甲醇，收率93％。

4)5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-甲醛的制備

將50g(324mmol)5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-甲醇加到500mL二氯甲烷中，再加入282g(3242mmol)二氧化錳，室溫下攪拌反應(yīng)24h。抽濾，加硅藻土，濾餅用無水乙醇(500mL*3)洗三次，減壓濃縮。得淡黃色固體43g為所述5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-甲醛，收率87％。

5)N,N-二乙?；哙?2,5-二酮的制備

將50g(438mmol)甘氨酸酐加入到179g(1753mmol)的乙酸酐中，至于155℃油浴下攪拌回流反應(yīng)30h，減壓濃縮。再用二氯甲烷溶解，鋪硅藻土及硅膠溶過濾，濾餅用二氯甲烷淋洗，減壓濃縮，70℃用乙酸乙酯溶解重結(jié)晶，得褐色固體74g為所述N,N-二乙?；哙?2,5-二酮，收率85％。

6)(Z)-1-乙?；?3-((5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-基)亞甲基)哌嗪-2,5-二酮的制備

將1g(6.5mmol)5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-甲醛加入到7mLDMF，再加入2.59g(13mmol)N,N-二乙?；哙?2,5-二酮氮?dú)獗Ｗo(hù)排三次氣，加入3.19g(9.8mmol)碳酸銫，氮?dú)獗Ｗo(hù)排三次氣，室溫下避光攪拌反應(yīng)20h。將反應(yīng)液傾入(100mL)冰水中，抽濾，濾餅依次用水(100mL*2)、石油醚：乙酸乙酯＝8:1(90mL)洗，濾餅用乙醇和二氯甲烷超聲分散，濾去不溶物，減壓濃縮，無水乙醇帶水。再用乙酸乙酯(50mL)打漿。得棕黃色固體0.89g為所述(Z)-1-乙?；?3-((5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-基)亞甲基)哌嗪-2,5-二酮，收率46.9％。

7)(3Z,6Z)-3-[(5-叔丁基-1H-咪唑-4-基)亞甲基]-6-(苯亞甲基)-2,5-哌嗪二酮的制備

將0.85g(2.9mmol)(Z)-1-乙?；?3-((5-(叔丁基)-1H-咪唑-4-基)亞甲基)哌嗪-2,5-二酮加入到DMF，再加入0.56g(5.25mmol)苯甲醛氮?dú)獗Ｗo(hù)排三次氣，加入碳酸銫0.95g(2.9mmol)氮?dú)獗Ｗo(hù)排三次氣，程序升溫到80℃避光攪拌反應(yīng)24h。將反應(yīng)液傾入冰水(100mL)中，抽濾，濾餅依次用100mL*2水、90mL石油醚：乙酸乙酯＝8:1洗，濾餅用乙醇(30mL)和乙酸乙酯(100mL)超聲分散，濾去不溶物，減壓濃縮，無水乙醇帶水。50mL用乙酸乙酯分散，靜置于-30℃過夜。抽濾，濾餅用冰乙酸乙酯(5mL)洗滌，得黃色粉末狀固體0.59g，此晶型為(3Z,6Z)-3-苯亞甲基-6-((5-叔丁基-1H-咪唑-4-基)亞甲基)哌嗪-2,5-二酮的α晶型，收率60.1％。

1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.31(s,1H),12.22(s,1H),10.00(s,1H),7.84(s,1H),7.52(d,J＝8Hz,2H),7.39(t,J＝8Hz,2H),7.32(t,J＝8Hz,1H),6.86(s,1H)，6.73(s,1H),1.37(s,9H)；MS(ESI)m/z338.1715(M+H)+(calcdforC19H21N4O2338.1722)。如圖1所示，α晶型的X射線粉末2θ角衍射峰主要特征峰有：8.446°，11.546°，12.285°，13.161°，14.855°，16.043°，16.647°，17.136°，17.639°，18.130°，18.459°，19.473°，19.804°，20.742°，21.343°，22.338°，23.235°，24.868°，25.145°，27.596°。

參考文獻(xiàn)

[1][中國(guó)發(fā)明]CN201610665377.8脫氫苯基阿夕斯丁類化合物的多晶型及其制備方法