氯化硝基四氮唑藍 (NBT;N8140-Solarbio): 脫氫酶和其它過氧化酶的底物。用于測定葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase);也是凝血因子I(fibrinogen)的沉淀試劑。也是堿性磷酸酶底物之一，在堿性磷酸酶的催化下生成不溶性的藍色產物。常用于免疫組化(IHC)、免疫細胞化學(ICC)和蛋白印跡(WB)等實驗。NBT可作為一種篩查尿道感染的方法。氯化硝基四氮唑藍(NBT)還原法對血清糖化低密度脂蛋白及極低密度脂蛋白(SG LP-V P)進行測定，依據呈色的深淺直接用光密度表示SG LP-V P的濃度，并計算SG LP-V P的指數(shù)，取得的效果非常好。

氯化硝基四氮唑藍(NBT)作為一種重要的化學試劑，除在生化實驗、臨床體外診斷等領域具有重要應用價值外，在化妝品行業(yè)也有廣泛應用，尤其是在化妝品抗氧化功效檢測方面作用重大。

抗氧化是美容護膚界的最熱詞匯之一，抗氧化劑是化妝品起到抗氧化效果的關鍵組分，它們可與體內常見的自由基如羥自由基和超氧陰離子自由基等發(fā)生反應,防止脂質過氧化,起到祛斑、美白、防皺和抗衰老的功能。利用NBT法測定抗氧化劑活性或測定活性氧的消除率是評價化妝品抗氧化效果的重要參考。 

根據已公開報道，韓國三大化妝品公司之一的株式會社在檢測旗下化妝品抗氧化功效時用的就是NBT法[1]。在專利CN105267268A中，為了測定抗氧化效果，研發(fā)人員用NBT法測定由黃嘌呤與黃嘌呤氧化酶生成的活性氧，評價檢測物消除活性氧的效果，即活性氧消除效果。由黃嘌呤與黃嘌呤氧化酶生成活性氧。以在波長560nm測定這些活性氧與氯化硝基四氮唑藍(NBT)反應而生成的藍色來測定活性氧的消除率。

在化妝品抗氧化劑中，SOD、維生素C、維生素E等都是耳熟能詳?shù)拿?。SOD，即超氧化物歧化酶，作為抗氧化劑可使化妝品起到延緩肌膚衰老、祛斑的功效，國內外很多化妝品品牌旗下產品都加入了一定比例的 SOD。如法國的雅詩蘭黛石榴水、日本的 SKII 神仙水，以及國內大寶 SOD 蜜等。NBT法可測定SOD活性，其原理是氮藍四唑在蛋氨酸和核黃素存在條件下，照光后發(fā)生光化還原反應而生成藍色甲腙，藍色甲腙在560nm處有光吸收。SOD能抑制NBT的光化還原，其抑制強度與酶活性在一定范圍內成正比。

王麗麗等[2]使用NBT法測定新型化妝品抗氧化劑：DP5-8殼寡糖清除超氧陰離子的能力，并驗證了DP5-8殼寡糖較強的抗氧化能力和對羥自由基和超氧陰離子的清除能力。

參考文獻：

1.人參葉提取物制造方法及包含其為有效成分的化妝品組合物 CN105267268A

2.一種特定聚合度殼寡糖的制備方法及其在化妝品上的應用 CN110387392A