背景[1-3]
小鼠肝星狀細胞占肝臟固有細胞總數的15%，占非實質細胞的30%左右。HSC存在于Disse腔中，呈梭形或多邊形，胞漿內有多個富含維生素A的脂滴，其細長的突起向外延伸環(huán)繞在血竇內皮細胞外面，是體內儲存視黃醛衍生物的首要部位。在正常肝臟中，星狀細胞處于靜止狀態(tài)，不表達α平滑肌肌動蛋白（α-SMA），增殖活性低，合成膠原能力低，其主要功能是貯存視黃醛類。
肝星狀細胞是ECM的主要來源，HSC激活并轉化為肌成纖維細胞樣細胞(MFC)，各種致纖維化因素均把HSC作為最終靶細胞。肝星狀細胞激活并轉化為肌成纖維細胞樣細胞(MFC)，各種致纖維化因素均把HSC作為最終靶細胞，正常情況下肝星狀細胞處于靜止狀態(tài)。
當肝臟受到炎癥或機械刺激等損傷時，肝星狀細胞被激活，其表型由靜止型轉變?yōu)榧せ钚?。激活的肝星狀細胞一方面通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成和肝內結構的重建，另一方面通過細胞收縮使肝竇內壓升高。
正常情況下肝星狀細胞處于靜止狀態(tài)。當肝臟受到炎癥或機械刺激等損傷時，肝星狀細胞被激活，其表型由靜止型轉變?yōu)榧せ钚?。肝星狀細胞位于肝竇周Disse腔內，約占肝臟所有細胞的13%。在規(guī)HE染色的肝組織切片中，不能顯示星狀細胞，但可用免疫組織化學將其定位，并可將其分離進行體外細胞培養(yǎng)。
正常情況下肝星狀細胞呈靜止狀態(tài)，它在肝臟中的生理功能主要有參與維生素A的代謝，儲存脂肪的功能，肝星狀細胞的胞漿中含有類視黃醇物質的脂滴，是維生素A的主要儲存處，肝星狀細胞還有調節(jié)血管和肝竇血流的作用。
應用[4][5]
用于小鼠肝星狀細胞旁分泌機制在急性肝損傷再生修復中的作用研究
首先明確了活化的HSCs在急性肝損傷再生修復中的作用；接著建立了小鼠肝星狀細胞分離純化和體外培養(yǎng)模型,并觀察不同活化階段HSCs的生物學特性；最后探明活化的HSCs旁分泌途徑是否參與急性肝損傷再生修復的過程并闡述相關作用機制。
小鼠肝星狀細胞活化不良對急性肝損傷再生修復的影響目的明確活化的小鼠肝星狀細胞(mouse hepatic stellate cells,m-HSCs)在急性肝損傷時是否具有促進肝細胞有絲分裂和/或肝臟干細胞增殖的作用。方法在對乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)誘導的化學性急性肝損傷小鼠模型基礎上,通過連續(xù)腹腔注射膠毒霉素(gliotoxin,1mg/kg體重)消除肝內活化的星狀細胞,建立肝星狀細胞活化不良(loss of function)模型。
通過細胞毒性實驗,觀察gliotoxin對肝細胞和Kupffer細胞的影響。并利用該模型,從小鼠血清轉氨酶濃度、生存分析、肝細胞壞死及凋亡程度、CD45陽性淋巴細胞浸潤程度、肝細胞和卵圓細胞增殖能力等方面評估活化的HSCs在肝急性損傷再生修復中的作用。結果膠毒霉素的肝細胞毒性實驗顯示,膠毒霉素(3mg/kg體重)單次腹腔注射后,與對照組相比,在血清轉氨酶ALT、AST的濃度、肝損傷組織學評分、肝細胞增殖能力方面均無明顯差異(P>0.05)。m-HSCs活化不良模型中發(fā)現,Gliotoxin組活化的HSCs(a-SMA+-HSCs)數目為(13.13±2.92)/FOV,較對照組(130.12±20.44)/FOV下降90%,存在顯著統(tǒng)計學差異(P<0.01)。
碳顆粒吞噬實驗顯示,兩組小鼠肝內碳顆粒陽性Kupffer細胞的數目無明顯差異(P>0.05)。Gliotoxin組與對照組相比,血清轉氨酶ALT、AST的濃度分別升高73%(P<0.05)和72%(P<0.01),具有統(tǒng)計學差異。生存分析提示,Gliotoxin組小鼠5天生存率明顯下降為55%,對照組為89%,兩組間具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
參考文獻
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[5]常文舉.小鼠肝星狀細胞旁分泌機制在急性肝損傷再生修復中的作用[D].復旦大學,2011.