簡(jiǎn)介^[1]

IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被測(cè)量的拮抗劑的半抑制濃度。它能指示某一藥物或者物質(zhì)(抑制劑)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物質(zhì)，比如酶，細(xì)胞受體或是微生物)的半量。在凋亡方面，可以理解為一定濃度的某種藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡50%，該濃度稱為50%抑制濃度，即凋亡細(xì)胞與全部細(xì)胞數(shù)之比等于50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的濃度，IC50值可以用來(lái)衡量藥物誘導(dǎo)凋亡的能力，即誘導(dǎo)能力越強(qiáng)，該數(shù)值越低，當(dāng)然也可以反向說(shuō)明某種細(xì)胞對(duì)藥物的耐受程度。

利用噻唑蘭(MTT)，透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，活細(xì)胞線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性MTT還原為難溶于水的藍(lán)紫色的甲臜（Formazan）結(jié)晶并沉積在細(xì)胞中，結(jié)晶物能被二甲基亞砜（DMSO）溶解，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映細(xì)胞數(shù)量。

檢測(cè)步驟^[1]

1、細(xì)胞接種：收到客戶細(xì)胞后，我們會(huì)用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞，得出細(xì)胞懸液濃度。計(jì)算出應(yīng)稀釋倍數(shù)，按MTT試劑盒要求在96孔板內(nèi)接種相應(yīng)濃度的細(xì)胞懸液；

2、細(xì)胞培養(yǎng)：然后在無(wú)菌恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)接種好的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，并實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)； 

3、藥物處理并呈色：按不同濃度梯度加入藥物作用細(xì)胞；

4、溶解，比色：加入MTT檢測(cè)試劑，按操作要求孵育相應(yīng)時(shí)間，在酶標(biāo)儀內(nèi)檢測(cè)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的吸光值。并處理數(shù)據(jù)得出IC50結(jié)果。

主要參考文獻(xiàn)

[1] 趙斌 葛金芳 黃曉暉 李?。恍∽h在MTT法測(cè)細(xì)胞增殖抑制率中IC50的計(jì)算方法。第十一屆全國(guó)數(shù)學(xué)藥理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議