Proteinase, Tritirachium album-Serin- Chemische Eigenschaften,Einsatz,Produktion Methoden
R-S?tze Betriebsanweisung:
R36/37/38:Reizt die Augen, die Atmungsorgane und die Haut.
R42:Sensibilisierung durch Einatmen m?glich.
S-S?tze Betriebsanweisung:
S23:Gas/Rauch/Dampf/Aerosol nicht einatmen(geeignete Bezeichnung(en) vom Hersteller anzugeben).
S24:Berührung mit der Haut vermeiden.
S26:Bei Berührung mit den Augen sofort gründlich mit Wasser abspülen und Arzt konsultieren.
S36/37:Bei der Arbeit geeignete Schutzhandschuhe und Schutzkleidung tragen.
S22:Staub nicht einatmen.
Aussehen Eigenschaften
Proteinase K (aus Tritirachium album) chromatographisch gereinigt lyophilisiert 30 manson-E/mg für biochemische Zwecke und für die Molekularbiologie EC 3,4,21,14
Gefahren für Mensch und Umwelt
Bei Erhitzen Zerstörung durch Denaturierung.
Gesundheitsschädlich beim Verschlucken, Einatmen und bei Berührung mit der Haut. Reizt die Augen und die Haut. Reizwirkung auf die Schleimhäute und die oberen Atemwege. Kann allergische Hautreaktionen bewirken. Wiederholte Exposition kann Asthma bewirken.
Schutzma?nahmen und Verhaltensregeln
Arbeiten nur im Abzug durchführen. Staub nicht einatmen. Jeglichen Kontakt vermeiden.
Bei Auftreten von Stäuben Partikelmaske tragen.
Schutzbrille mit Seitenschutz und oberer Augenraumabdeckung
Chemikalienresistente Schutzhandschuhe.
Nach Gebrauch gründlich waschen. Vorbeugender Hautschutz empfohlen.
Schutzkleidung tragen.
Verhalten im Gefahrfall
Reinigungsverfahren: In einen Plastikbeutel aufnehmen und entsorgen. Staubbildung vermeiden. Betroffene Zone nach völliger Beseitigung des Materials gründlich lüften und reinigen.
Wassersprühstrahl, Kohlendioxid, Trockenlöschmittel oder geeigneter Schaum.
Im Falle eines Brandes entstehen giftige und reizende Zersetzungsprodukte.
Erste Hilfe
Nach Hautkontakt: Nach Berührung sofort mit Seife und viel Wasser abwaschen.
Nach Augenkontakt: 15 Minuten bei gespreizten Lidern unter fließendem Wasser mit Augendusche ausspülen. Augenarzt konsultieren!
Nach Einatmen: Frischluft ggf. Atemspende oder Gerätebeatmung.
Nach Verschlucken: Viel Wasser trinken lassen, Erbrechen auslösen, Arzt hinzuziehen.
Ersthelfer: siehe gesonderten Anschlag
Sachgerechte Entsorgung
Falls Recycling nicht möglich, als Sonderabfall entsorgen, zuständige Stellen: Hubland-Herr Riepl:8884711, Klinikum-Herr Uhl:2015557.
Beschreibung
Proteinase K is a proteolytic enzyme (a serine protease) naturally found in the mold Tritirachium album. In solution, it is stable over a pH range of 4.0–12.5 with an optimum of pH 8.0, and a temperature range of 25°C–65°C. The enzyme has two binding sites for Ca++, though in the absence of this divalent cation some catalytic activity is retained. Maximum proteinase K activity is observed with the inclusion of 1 mM Ca++ in the reaction buffer. Proteinase K digestion is routinely performed at 50°C, and occasionally in the presence of EDTA to inhibit labile, Mg++-dependent nucleases. Proteinase K is prepared commonly as a 20 mg/mL stock solution in sterile water (stable for 1 year at ?20°C) or in a solution of 50 mM Tris, pH 8.0, 1 mM CaCl2 (stable for months at 4°C). It is generally used at a working concentration of up to 50 μg/mL in any of a number of buffer formulations, including those that contain as much as 0.5% SDS[1].
Chemische Eigenschaften
Powder beige
Verwenden
A stable and highly reactive serine protease; used for protein and nucleic acid isolation.Proteinase K is used in the purification of RNA and DNA from tissues or cell lines. It finds application in protein modification, determination of enzyme localization and inactivation of RNases/DNases during nucleic acid extraction. It is also used in mitochondria isolation and removal of endotoxins bound to cationic proteins like lysozyme and ribonuclease A. Further, it is involved in the treatment of paraffin embedded tissue sections in order to expose antigen binding sites for antibody labeling.
Definition
Proteinase K cleaves peptide bonds next to the carboxyl-terminal of aromatic amino acids, hydrophobic amino acids and sulfuric amino acids, within the polypeptide chain. Hence Proteinase K can act as an endoprotease on a wide range of protein substrates. Because of its proteolytic preferences, it is a member of the subtilisin group of serine proteases. The K in Proteinase K refers to its ability to digest Keratin protein found in hairs, nails and hooves. Proteinase K is an essential reagent in molecular biology labs because it is useful in isolating DNA and RNA molecules by degrading and inactivating proteins. Fungus Tritirachium album Limber naturally produces proteinase K.
Allgemeine Beschreibung
Proteinase K, an extracellular endopeptidase is synthesized by the mold,
Tritirachium album Limber. Proteinase K belongs to a new subfamily of the subtilisins. It is a 277 amino acid protein and is characterized with an unhydrolyzed protein chain and autolyzed polypeptide chains.
Mechanism of action
Proteinase K is a serine protease that cleaves peptide bonds in proteins. Its mechanism of action involves several steps:
Binding: Proteinase K first binds to the protein or nucleic acid substrate through non-specific hydrophobic interactions.
Activation: Once bound, the enzyme undergoes an activation step where a catalytic serine residue is activated by a histidine residue and a water molecule. This leads to the forming of an active site that can cleave peptide bonds.
Cleavage: The active site of proteinase K cleaves the peptide bond on the carboxylic acid side of the amino acid residues that contain aromatic, aliphatic or hydrophobic amino acid residues. The enzyme can also cleave peptide bonds on the amide side of glycine residues.
Product release: After cleavage, the products of the reaction (i.e., peptides) are released from the enzyme.
The mechanism of action of proteinase K is similar to other serine proteases. Still, it is notable for its ability to function under harsh conditions, such as high temperatures and in the presence of detergents.
Proteinase, Tritirachium album-Serin- Upstream-Materialien And Downstream Produkte
Upstream-Materialien
Downstream Produkte
