"IAR 20大鼠肝復蘇細胞(附STR鑒定報告)

細胞生長：貼壁

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞內空泡通常是細胞受到壓力的表現(xiàn)，原因可能是培養(yǎng)基中缺乏谷氨酰胺、添加抗真菌劑、不適當?shù)腃O2環(huán)境對培養(yǎng)基中碳酸氫鈉濃度或培養(yǎng)基的營養(yǎng)消耗殆盡。一般來說，對于某些細胞系，尤其是向3T3-L1這樣具有脂滴的細胞，細胞包含空泡是正常的。缺氧：當缺氧時 細胞na泵動力不足導致細胞內水儲留，Na泵動力不足導致其不能向細胞外運送足量的Na，從而使細胞內處于GAO滲透壓狀態(tài)，更多胞外水分子進入胞內，造成水儲留?？梢岳斫鉃橐驗樗值牧魇В毎麅瘸霈F(xiàn)細胞質的濃縮，從而出現(xiàn)空泡。原代細胞培養(yǎng)的過程中經常出現(xiàn)這樣的情況，是有些細胞處于終末分化狀態(tài)，不會再分裂，時間長了就會空泡化而死亡。傳代細胞出現(xiàn)這種狀況比較少見，可能的原因是細胞代齡較長，老化嚴重。傳代次數(shù)太多，細胞老化會出現(xiàn)上述的情況，但是還不排除其他因素，胞質中出現(xiàn)顆粒、脂滴或空泡也可能是細胞代謝不良的反應。我前一段時間養(yǎng)成纖維細胞（原代）的時候也出現(xiàn)過類似的情況?？梢詫⒀宓臐舛忍酖AO10％到15％到20％；血清的質量，如果是國內的血清的話不同的批次之間的差異很大，可以借用些質量HAO的血清試試，看細胞狀態(tài)是否會改變；把細胞消化收集起來，然后離心后重懸，重新種植。培養(yǎng)基里添加谷氨酰氨；細胞代謝障礙的問題，傳代的次數(shù)可能不是關鍵因素,應該可以調整得過來；PH值不對，就用PH值試紙測了一下，大概6.7左右，加碳酸氫鈉調到7.2左右,過了一段就HAO了。不排除輕度污染的可能，重度污染會伴有培養(yǎng)液的渾濁；培養(yǎng)液的PH值與細胞正常所需PH值差別太大；還有一個大家易忽略的問題，我們從相關權威資料中查到如果消化細胞吹打時力度過大，產生太多氣泡，長期存在也會出現(xiàn)這種現(xiàn)象。

OVCAR4細胞類似產品：：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞

KM932細胞類似產品：：T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞

FRO81-2細胞類似產品：：RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞

KHYG細胞類似產品：：Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

IAR 20大鼠肝復蘇細胞(附STR鑒定報告)

在使用胰酶細胞消化液的過程中要別注意避免消化液被細菌污染。胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。貼壁細胞的消化：吸去培養(yǎng)液，用無菌的PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清；加入少量胰酶細胞消化液，略蓋過細胞即可，根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘（不同的細胞消化時間有所不同）；顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛HAO可以被吹打下來；此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。常用的細胞消化液為胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等，其功能主要是使細胞間的蛋白質（如細胞外基質）水解，改變細胞間的連接，使組織或細胞片分散成單個細胞，制成細胞懸液用于進一步的實驗。

細胞背景資料：肝； BDVI

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

IAR 20大鼠肝復蘇細胞(附STR鑒定報告)

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

MDA-MB-157細胞類似產品：：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞

YD-15細胞類似產品：：Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞

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A9(Hamprecht)細胞類似產品：：SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài)，黑點是否游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良HAO，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:細胞生長過老，破碎的細胞殘??；血清質量不HAO，反復凍融的結果；配制培養(yǎng)基的pH值偏GAO，不宜細胞生長；配制培養(yǎng)基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點；培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質，多次傳代可以消除。

細胞生長特性：貼壁

HCT.116細胞類似產品：：SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞

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IAR 20大鼠肝復蘇細胞(附STR鑒定報告)

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Madison lung細胞類似產品：：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞

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