"IAR20細胞系|大鼠肝細胞
HS-C03６６６５１
細胞背景資料：肝； BDVI
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
IAR20細胞系|大鼠肝細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
HSC-１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Marc１４５細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２傳代
QBI-２９３A細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
C３H/１０T１/２, Clone ８細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
JurkatD,E細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
COS-６細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
IAR20細胞系|大鼠肝細胞
細胞生長特性：貼壁
細胞培養(yǎng)無菌操作的演示：凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌，繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處，使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈，動作要輕、準確，不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自來水刷洗，除去灰塵。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干：１２小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清潔液浸泡１２小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗１５次，最后蒸餾水沖洗３-５次和用雙蒸水過３次。烘干、包裝：洗干凈后先烘干，然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒：包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子，打開開關(guān)和安全閥，當蒸氣成直線上升時，關(guān)閉安全閥，當指針指向１５磅時，維持２０-３０分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中，泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清潔液(酸液)，１２小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗)，再用蒸餾水沖洗３次。烘干、包裝：洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
A７R５細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
hESC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hep ３B２.１-７細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SW１４１７細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：２—１：４傳代，每周換液１-２次
U８７ MG細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代
TE-４細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
IAR20細胞系|大鼠肝細胞
DiFi細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SRBR３細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LP-１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SV４０-MES-１３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：心肌成纖維細胞樣；細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
RAW２６４.７細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：不規(guī)則圓形；細胞傳代方法：１：２傳代
CNE２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代
LCC１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１９１５[H１９１５]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCC-１５細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hs ６００.T細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代，２-３天換液１次。
THC８３０７細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
IEC-６細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代
SN４７４１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Eca-１０９細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１９７５細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
HIEC細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
U２６６細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２傳代，４-５天傳代一次
MTEC１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CMT１６７細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
PSN１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：２-１：６傳代，２-３天換液１次。
MEC５７細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H２０５２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：３-１：６傳代
NCI-H２１０６細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：每周換液２次。
SW１１１６細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
HT２２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長 ；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２傳代
SNU８８６細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HT細胞系；細胞生長特性：懸浮生長 ；細胞形態(tài)特性：淋巴母細胞樣；細胞傳代方法：每２-３天換液
Hep-G２細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HSC-１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TSCC１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LA７９５細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hurt-７８細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
bEnd.３細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１７９２細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
AML１２細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２傳代
BGC-８２３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
SW１９９０細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
HCC１４２８細胞系；細胞生長特性：貼壁生長，偶爾上皮細胞液泡的形成；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：４-１：８傳代；每周換液２-３次。
NCI-H１７３４細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：４-１：６傳代。
HFLS-RA細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
ChaGo-K-１細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞；細胞傳代方法：１：４-１：８傳代；每周換液２次。
PBMC細胞系；細胞生長特性：懸??；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NUGC-３細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：６傳代
FL６２８９１細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
DCS細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
DK-MG細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
IOSE８０細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
BHK細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣；細胞傳代方法：１：２傳代，每周換液１-２次。
SNU-５細胞系；細胞生長特性：多細胞聚集、懸浮生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：２-３天補液一次。
NCI-H１０９２細胞系；細胞生長特性：懸浮生長；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：隨細胞的密度而增加
Malmc細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
VP２６７細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
AC１６細胞系；細胞生長特性：貼壁；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
LS １８０細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：１：２-１：５傳代，每周２-３次換液。
HCC-９２０４細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
TE-１４細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮樣；細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
IAR20細胞系|大鼠肝細胞
T/GHA-VSMC細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Sf-２１細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H２１２６細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，每周２-３次。
NCI-H１５６３[H１５６３]細胞系；細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分；細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書；細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Hs７４６T細胞系；細胞生長特性：貼壁生長；細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣；細胞傳代方法：１：３傳代,２-３天傳一代
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