"OCM-1A Cell|人脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：脈絡(luò)膜黑色素瘤；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

OCI-Ly 18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞

TALL1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VERO76細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、HBVP細(xì)胞

OCI-Ly8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FRTL5細(xì)胞、LS 180細(xì)胞、BCaP-37細(xì)胞

BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H740細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞

SW780細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit 225-K6細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

OCM-1A Cell|人脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Hs 870.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞

SO-RB50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞

JIMT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞

MLE 12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLA144細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞、GM03569細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

Hs 870.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞

SO-RB50細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U118-MG細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞、H-660細(xì)胞

JIMT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HECV細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞

MLE 12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MLA144細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞、GM03569細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

HuT-102細(xì)胞類似產(chǎn)品：：102PT細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞

HMrSV5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞

NCIH1581細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-125細(xì)胞、EB-2細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞

MDBK (NBL-1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H378細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞、COR-L23/P細(xì)胞

DV90細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞

Hs 766.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞

NCIH2342細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞

Hs-852-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-343MG細(xì)胞、H-295R細(xì)胞、ACC2細(xì)胞

NBL-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PT-K75細(xì)胞、GM-637細(xì)胞、WI 38細(xì)胞

ATN-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Kit 225細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞、H1915細(xì)胞

OCM-1A Cell|人脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞

UM2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞

Hs 636 T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞

SCC-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞

HCC-1806細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞

2E8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCT 8細(xì)胞、U-87細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞

KU 812F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞

KU 812F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞

UPCISCC154細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FTC133細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞、138 MG細(xì)胞

Hs 600.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B 95.8細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞、H1963細(xì)胞

H1703細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞

Ramos(RA1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：IPEC-J2細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞

HCC-78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞

M1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB-1細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞

P1-Raji細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCC-10RGB細(xì)胞、MG-HU-3細(xì)胞、OCI-AML-5細(xì)胞

Mo7e細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞

JKT-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞

NCI-H2009細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHP 212細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞

PC-9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞

Pa14C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DLD 1細(xì)胞、HL7702細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞

Swiss 3T6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GM02219D細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、KM-12細(xì)胞

TFK-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PNT1A細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞、MDA PCa 2b細(xì)胞

Helacyton gartleri細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCGC細(xì)胞、VP229細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞

Tn5B1-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞

GM07404細(xì)胞類似產(chǎn)品：：639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞

BCP1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M4e細(xì)胞、SK-CO-1細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞

CCF-STTG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MT-2J細(xì)胞、ME 180細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞

Vero 76 clone E-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞

H596細(xì)胞類似產(chǎn)品：：GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞

S91細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EFM192細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞

OCM-1A Cell|人脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞

IHH-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PE CA PJ34細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞、L 132細(xì)胞

Panc 03.27細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Scott細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞

KLN 205細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-175細(xì)胞、COLO357細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞

BALB/3T3 clone A31細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CHO-ori細(xì)胞、RC-2細(xì)胞、LS-174細(xì)胞

EC-GI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞

HeLa 229細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2cl.D1細(xì)胞、LS 180細(xì)胞、FRTL5細(xì)胞

Gerner 7666細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 821.T細(xì)胞、RT 112細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞

MiaPaCa2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEC151細(xì)胞、CA 46細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞

MiaPaCa2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEC151細(xì)胞、CA 46細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞

NCI-H735細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA433細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞、OsACL細(xì)胞

HCT116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞

SJSA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 12T細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞、Th17細(xì)胞

MPC-5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞

TF-1a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Karpas299細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞、S37細(xì)胞

H-2286細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WERI Rb-1細(xì)胞、LSC-1細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞

PL9細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞

HNE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RINm5F細(xì)胞、TE-14細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞

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