"OCM-1A Cell|人脈絡膜黑色素瘤細胞

細胞背景資料：脈絡膜黑色素瘤；女性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。

細胞生長：貼壁

OCI-Ly 18細胞類似產(chǎn)品：：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞

TALL1細胞類似產(chǎn)品：：VERO76細胞、3T3-L1 ad細胞、HBVP細胞

OCI-Ly8細胞類似產(chǎn)品：：FRTL5細胞、LS 180細胞、BCaP-37細胞

BNL.1ME A.7R.1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H740細胞、MCF-7ADR細胞、Liver-02細胞

SW780細胞類似產(chǎn)品：：Kit 225-K6細胞、Evsa T細胞、NPC-TW-039細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

OCM-1A Cell|人脈絡膜黑色素瘤細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Hs 870.T細胞類似產(chǎn)品：：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞

SO-RB50細胞類似產(chǎn)品：：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞

JIMT細胞類似產(chǎn)品：：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞

MLE 12細胞類似產(chǎn)品：：MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

Hs 870.T細胞類似產(chǎn)品：：RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞

SO-RB50細胞類似產(chǎn)品：：U118-MG細胞、NP69SV40T細胞、H-660細胞

JIMT細胞類似產(chǎn)品：：HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞

MLE 12細胞類似產(chǎn)品：：MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

HuT-102細胞類似產(chǎn)品：：102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞

HMrSV5細胞類似產(chǎn)品：：CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞

NCIH1581細胞類似產(chǎn)品：：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞

MDBK (NBL-1)細胞類似產(chǎn)品：：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞

DV90細胞類似產(chǎn)品：：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞

Hs 766.T細胞類似產(chǎn)品：：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞

NCIH2342細胞類似產(chǎn)品：：RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞

Hs-852-T細胞類似產(chǎn)品：：U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞

NBL-12細胞類似產(chǎn)品：：PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞

ATN-1細胞類似產(chǎn)品：：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞

OCM-1A Cell|人脈絡膜黑色素瘤細胞

UM2細胞類似產(chǎn)品：：Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞

Hs 636 T細胞類似產(chǎn)品：：SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞

SCC-15細胞類似產(chǎn)品：：MKN 28細胞、SK-MEL-1細胞、OB2細胞

HCC-1806細胞類似產(chǎn)品：：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞

2E8細胞類似產(chǎn)品：：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞

KU 812F細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞

KU 812F細胞類似產(chǎn)品：：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞

UPCISCC154細胞類似產(chǎn)品：：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞

Hs 600.T細胞類似產(chǎn)品：：B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞

H1703細胞類似產(chǎn)品：：DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞

Ramos(RA1)細胞類似產(chǎn)品：：IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞

HCC-78細胞類似產(chǎn)品：：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞

M1細胞類似產(chǎn)品：：VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞

P1-Raji細胞類似產(chǎn)品：：RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞

Mo7e細胞類似產(chǎn)品：：H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞

JKT-1細胞類似產(chǎn)品：：HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞

NCI-H2009細胞類似產(chǎn)品：：CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞

PC-9細胞類似產(chǎn)品：：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞

Pa14C細胞類似產(chǎn)品：：DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞

Swiss 3T6細胞類似產(chǎn)品：：GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞

TFK-1細胞類似產(chǎn)品：：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞

Helacyton gartleri細胞類似產(chǎn)品：：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞

Tn5B1-4細胞類似產(chǎn)品：：PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞

GM07404細胞類似產(chǎn)品：：639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞

BCP1細胞類似產(chǎn)品：：M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞

CCF-STTG1細胞類似產(chǎn)品：：MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞

Vero 76 clone E-6細胞類似產(chǎn)品：：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞

H596細胞類似產(chǎn)品：：GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞

S91細胞類似產(chǎn)品：：EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞

OCM-1A Cell|人脈絡膜黑色素瘤細胞

IHH-4細胞類似產(chǎn)品：：PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞

Panc 03.27細胞類似產(chǎn)品：：Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞

KLN 205細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-175細胞、COLO357細胞、Hep3B細胞

BALB/3T3 clone A31細胞類似產(chǎn)品：：CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞

EC-GI細胞類似產(chǎn)品：：MV-3細胞、PK13細胞、293-GP細胞

HeLa 229細胞類似產(chǎn)品：：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞

Gerner 7666細胞類似產(chǎn)品：：Hs 821.T細胞、RT 112細胞、HEK 293A細胞

MiaPaCa2細胞類似產(chǎn)品：：HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞

MiaPaCa2細胞類似產(chǎn)品：：HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞

NCI-H735細胞類似產(chǎn)品：：OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞

HCT116細胞類似產(chǎn)品：：Rat podocyte細胞、MKN 45細胞、SK-N-BE(2)C細胞

SJSA細胞類似產(chǎn)品：：CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞

MPC-5細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞

TF-1a細胞類似產(chǎn)品：：Karpas299細胞、KYSE-140細胞、S37細胞

H-2286細胞類似產(chǎn)品：：WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞

PL9細胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞

HNE1細胞類似產(chǎn)品：：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞

"