"OCM-1 Cell|人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：葡萄膜黑色素瘤；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長。

細(xì)胞生長：貼壁

IBRS2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DoTc2-4510細(xì)胞、NCI-H1092細(xì)胞、SW780細(xì)胞

OCI/AML-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDST8細(xì)胞、H-1993細(xì)胞、P-3J細(xì)胞

GC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、HSF2細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞

JROECL 33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOCF細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、TE-85細(xì)胞

FDCP-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

OCM-1 Cell|人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

NCI H226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC78細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞

Hs821T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞

HEK 293 c18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞

H4-II-EC3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

NCI H226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC78細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞

Hs821T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞

HEK 293 c18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞

H4-II-EC3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

H548細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞

LWnt-3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞

CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞類似產(chǎn)品：：UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞

DMS273細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞

NCIH345細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO 738細(xì)胞、MT4細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞

GM3569細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞

KRC Y細(xì)胞類似產(chǎn)品：：L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞

T173細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞

U251細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞

LC-MS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞

OCM-1 Cell|人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞

Lu99A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-F1細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞、MBT2細(xì)胞

L-132細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞

H2126細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AMC-HN-8細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞

COR-L23/P細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞

TFH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAW 264.7細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞

MDA MB 175 VII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、H-1623細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞

MDA MB 175 VII細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞、H-1623細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞

CHP-100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞

HS-294-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞

MOLT.4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H295細(xì)胞、A2780S細(xì)胞、DCS細(xì)胞

CTX TNA2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞

ONS76細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞

CCF-STTG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MT-2J細(xì)胞、ME 180細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞

Hi-five細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞

GM2132細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞

T-CAM2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-52PE細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞、H1993細(xì)胞

A2780CP70細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞

TSU-Pr1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞

H-508細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞

PG-4(S+L-)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞

QGY細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CCD-1112sk細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞

SN12C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞

Clone Y1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞

Jiyoye(P-2003)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、ECC1細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞

SW1116細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞

WM 2664細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞

NCI-N87細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞

HRCEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calu3細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞、OCI-Ly 10細(xì)胞

HFL1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MC3T3細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞

OCM-1 Cell|人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞

HCC202細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞

COLO-320DM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞

OCILY3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞

SJRH 30細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞

IHC-ST1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Be-Wo細(xì)胞、H-3255細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞

A-172 MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞

253J-Bladder-V細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LA 4細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞、PAI細(xì)胞

293S細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞

HT1376細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞

NIHOVCAR3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞

MES-SA/Dx5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Glioma-261細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞、HANK1細(xì)胞

NHRF細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞

Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞

MDA-468細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞

BIU-87/Adr細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA 432細(xì)胞、PF-382細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞

WBF344細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC1428細(xì)胞、TF-1細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞

Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞

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