"LA-4 [Mouse lung adenoma] Cell|小鼠肺癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：肺癌；A/He

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

DAKIKI Clone 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞

PL 45細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RK 13細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞

SEG1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H929細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞

LL/2 (LLC1)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa229細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、H711細(xì)胞

SU-DHL1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Wien 133細(xì)胞、HEB細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

LA-4 [Mouse lung adenoma] Cell|小鼠肺癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問(wèn)題，一不留神就會(huì)全盤(pán)皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開(kāi)始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過(guò)夜，將過(guò)夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

AR4IP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞

OCM-1A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞

Karpas299細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞

NCIH1573細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

AR4IP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞

OCM-1A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞

Karpas299細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞

NCIH1573細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

經(jīng)過(guò)40-50次分裂的渡過(guò)第二次死亡危機(jī)的細(xì)胞，稱之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限，則稱之為有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）；已獲無(wú)限繁殖能力的細(xì)胞系，稱連續(xù)或無(wú)限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）。無(wú)限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化，具異倍體核型，可能成為惡性細(xì)胞，因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。無(wú)限細(xì)胞系有永生性（不死性），但仍保留接觸抑制和無(wú)異體接種致死；有的有永生性，異體接種有致瘤性，說(shuō)明已惡性化。由某一細(xì)胞系分離出來(lái)的、在性狀上與原細(xì)胞系不同的細(xì)胞系，稱亞系（Subline）。這是現(xiàn)有細(xì)胞系中多的一類，中國(guó)已建細(xì)胞系主要為這類細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類上皮型細(xì)胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。對(duì)已建成的各種細(xì)胞系或細(xì)胞株習(xí)慣上都給以名稱；細(xì)胞的命名無(wú)嚴(yán)格統(tǒng)一規(guī)定，大多采用有一定意義縮寫(xiě)字或代號(hào)表示。但不論什么形式，均不宜太長(zhǎng)，以便記憶和了解。

KYSE-180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM190細(xì)胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞

UACC-893細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HGC27細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞、NB19細(xì)胞

Anglne細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COC1/CDDP細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞、GM03573細(xì)胞

J-82細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293EBNA細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞

MuM-2C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs688(A)T細(xì)胞、Calu6細(xì)胞、OV2008細(xì)胞

NK-92.05細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞

OCI/AML-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞

T-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CWR22-Rv1細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞

H-660細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3X63細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞

T. T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞

LA-4 [Mouse lung adenoma] Cell|小鼠肺癌細(xì)胞

PCI-SG231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT1376細(xì)胞、DU-145細(xì)胞、DF1細(xì)胞

Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 134VI細(xì)胞、HOS細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞

253JBV細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT549細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞

HPAF-II細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞

HCC-1359細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-159PT細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞

Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞類似產(chǎn)品：：EM3細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞

SGC 7901細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-2932細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞

L1210細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞

DAKIKI Clone 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-431細(xì)胞、766T細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞

OCI-AML-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-294T細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞

Hs839T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：U-87MG ATCC細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞

L Wnt-3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HANK1細(xì)胞、FRO細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞

BHK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞

NCIH1568細(xì)胞類似產(chǎn)品：：THEECs細(xì)胞、118 MG細(xì)胞、RPMC細(xì)胞

NCIH2122細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞

PC3M-2B4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO684細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞

GC-1 spg細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞

IEC-18細(xì)胞類似產(chǎn)品：：McA-RH7777細(xì)胞、CTV1細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞

SK-MEL-28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞

SP-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FBHE細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞

NCI-H711細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞

SW-626細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Malme-3 M細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞

CWR-22rv1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞

TCam 2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COLO-320-HSR細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞

BC-3H-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞

Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞

CHO-Lec1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞

H2030細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Molm14細(xì)胞、CALU1細(xì)胞、L 1210細(xì)胞

H-1734細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JM-1細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞

LA-4 [Mouse lung adenoma] Cell|小鼠肺癌細(xì)胞

BCP-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、High-5細(xì)胞、H-810細(xì)胞

MC 3T3-E1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞

MDA-MB 361細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞、SF-126細(xì)胞

KTCTL-140細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C518細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞、H-1954細(xì)胞

HCC-1419細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Adeno 293細(xì)胞、MCFs細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞

GM03571細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞

ROS 17/28細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A-427細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞、Ly19細(xì)胞

A 375細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 746T細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞、451Lu細(xì)胞

HEK (AD293)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞

DI TNC-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MXI細(xì)胞、KP-4細(xì)胞、SW948細(xì)胞

TSU-Pr1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞

SCC090細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞

RA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞

NCI-H1184細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞

MA104細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞

Microbiological Associates-104細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞

WiDr細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞

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