"LA-4 [Mouse lung adenoma] Cell:小鼠肺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:肺癌;A/He
KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
LA-4 [Mouse lung adenoma] Cell:小鼠肺癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
C17.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞
HFL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞
RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞
GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞
CFPAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
細胞生長特性:貼壁
LA-4 [Mouse lung adenoma] Cell:小鼠肺癌細胞系
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
OCI-Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 49F細胞、HFT 8810細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞
LC-1/sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
NT2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞
RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma] Cell:小鼠肺癌細胞系
NCI-H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞
CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
WM115mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
MDA-MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞
Hs852細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞
CCD-19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞
CAL 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞
TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞
OCIAML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞
LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
HFT 8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞
I90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞
HEYA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
Hs 819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
H-676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞
NCIH2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
SK-Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞
Calu-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
MDCC-MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma] Cell:小鼠肺癌細胞系
H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞
COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞
NS653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞
H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞
SUM102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞
NIH3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞
H9c2(2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
LN229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞
Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細胞、HT clone H9細胞、C17.2細胞
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