"MN9D Cell|小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞

細胞背景資料：多巴胺能神經(jīng)元細胞

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不HAO，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站YOU勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當(dāng)他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，Zui終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風(fēng)機不能過大，風(fēng)機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。

細胞生長：貼壁

SK MEL 5細胞類似產(chǎn)品：：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞

SHEE細胞類似產(chǎn)品：：COLO320/DM細胞、SK-Mel 2細胞、NCIH847細胞

HEp-2細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat-E6細胞、H-889細胞、RGC-6細胞

HEK AD293細胞類似產(chǎn)品：：P3-X63.Ag8.653細胞、LN229細胞、SU4細胞

MA-782細胞類似產(chǎn)品：：HCT8細胞、DLD-1細胞、PLC-8024細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

MN9D Cell|小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

COLO679細胞類似產(chǎn)品：：EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞

MDAMB361細胞類似產(chǎn)品：：HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞

NCIH69細胞類似產(chǎn)品：：RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞

JM細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

COLO679細胞類似產(chǎn)品：：EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞

MDAMB361細胞類似產(chǎn)品：：HuH-6細胞、SW1783細胞、HT1080細胞

NCIH69細胞類似產(chǎn)品：：RD 2細胞、H-1963細胞、ASPC1細胞

JM細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

HuP-T3細胞類似產(chǎn)品：：SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞

Y3-Ag1.2.3細胞類似產(chǎn)品：：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞

HPB-ALL細胞類似產(chǎn)品：：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞

Molm 13細胞類似產(chǎn)品：：NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞

DF1細胞類似產(chǎn)品：：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞

IEC6細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞

UMR-106細胞類似產(chǎn)品：：NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞

ECC10細胞類似產(chǎn)品：：HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞

MDCKII-WT細胞類似產(chǎn)品：：MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞

AK細胞類似產(chǎn)品：：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞

MN9D Cell|小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞

SW 1088細胞類似產(chǎn)品：：NTera2/D1細胞、Hs888T細胞、ECV 304細胞

CCK81細胞類似產(chǎn)品：：HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞

P3HR-1細胞類似產(chǎn)品：：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞

IGR.OV1細胞類似產(chǎn)品：：HT 1197細胞、C38細胞、GM17346細胞

Ishikawa細胞類似產(chǎn)品：：C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞

KALS-1細胞類似產(chǎn)品：：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞

Alexander cells細胞類似產(chǎn)品：：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞

HCC0078細胞類似產(chǎn)品：：HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞

MCF-12F細胞類似產(chǎn)品：：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞

H1975細胞類似產(chǎn)品：：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞

MES 13細胞類似產(chǎn)品：：MCA38細胞、HLEB-3細胞、SUM 149PT細胞

CA 46細胞類似產(chǎn)品：：D283 Med細胞、WERI-Rb 1細胞、Colo741細胞

JIII細胞類似產(chǎn)品：：MDA-MB-468細胞、LS1034細胞、3D4/21細胞

NCIH460細胞類似產(chǎn)品：：Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞

H-1882細胞類似產(chǎn)品：：IPECJ2細胞、K7M2細胞、MIA PaCa-2細胞

LIXC002細胞類似產(chǎn)品：：OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞

KTA7細胞類似產(chǎn)品：：NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞

NCI-H1882細胞類似產(chǎn)品：：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞

PIGI細胞類似產(chǎn)品：：GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞

Chang Cells細胞類似產(chǎn)品：：Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞

Human Foreskin Fibroblast細胞類似產(chǎn)品：：STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞

NCIH510細胞類似產(chǎn)品：：N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞

JeKo 1細胞類似產(chǎn)品：：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞

RSC-364細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞

U-343MG細胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞

RS(4;11)細胞類似產(chǎn)品：：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞

Hs-729-T細胞類似產(chǎn)品：：RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞

NPC-TW039細胞類似產(chǎn)品：：Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞

COS7細胞類似產(chǎn)品：：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞

MN9D Cell|小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細胞

BCPAP細胞類似產(chǎn)品：：NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞

brain-derived Endothelial cells.3細胞類似產(chǎn)品：：NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞

GDM1細胞類似產(chǎn)品：：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞

SW 480細胞類似產(chǎn)品：：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞

SW 1573細胞類似產(chǎn)品：：Sp 2817細胞、CBRH7919細胞、MDA231細胞

OV-CA 432細胞類似產(chǎn)品：：KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞

SNU1040細胞類似產(chǎn)品：：16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞

MKN 28細胞類似產(chǎn)品：：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞

FDC-P1細胞類似產(chǎn)品：：CMT-93細胞、NCTC clone 929細胞、COLO 829細胞

B16/F0細胞類似產(chǎn)品：：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞

Sp2/mIL-6細胞類似產(chǎn)品：：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞

CCD18Co細胞類似產(chǎn)品：：HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞

207細胞類似產(chǎn)品：：CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞

Hep-G2/C3A細胞類似產(chǎn)品：：alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞

H-841細胞類似產(chǎn)品：：SUM 102PT細胞、MES-SA細胞、CEM/0細胞

OC-3-VGH細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞

BJA-B1細胞類似產(chǎn)品：：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞

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