"HIC Cell|人小腸癌細胞

細胞背景資料：小腸癌

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

AU565細胞類似產(chǎn)品：：BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞

HEY-A8細胞類似產(chǎn)品：：H1395細胞、D10細胞、VMRC-RCZ細胞

SNU-620細胞類似產(chǎn)品：：DoHH2細胞、RPMI 1846細胞、Hs 840.T細胞

SJCRH30細胞類似產(chǎn)品：：SBC-3細胞、SKNEP-1細胞、TM3細胞

SK-ES1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI 1788細胞、hTERT-HPNE細胞、RIN Cl-5F細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

HIC Cell|人小腸癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

Murine Lung Epithelial-12細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞

Panc_03_27細胞類似產(chǎn)品：：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞

RPPVEC細胞類似產(chǎn)品：：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞

KALS-1細胞類似產(chǎn)品：：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

Murine Lung Epithelial-12細胞類似產(chǎn)品：：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞

Panc_03_27細胞類似產(chǎn)品：：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞

RPPVEC細胞類似產(chǎn)品：：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞

KALS-1細胞類似產(chǎn)品：：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞

細胞生長特性：貼壁

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

JIMT-1細胞類似產(chǎn)品：：TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞

UPCI-SCC-90細胞類似產(chǎn)品：：OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞

251MG細胞類似產(chǎn)品：：Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞

JM-1細胞類似產(chǎn)品：：RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞

SJSA細胞類似產(chǎn)品：：CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞

CP-70細胞類似產(chǎn)品：：MHCC97-H細胞、SNU-5細胞、UMC-11細胞

IMCD3細胞類似產(chǎn)品：：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞

NCIH1975細胞類似產(chǎn)品：：SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞

COLO320-DM細胞類似產(chǎn)品：：HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞

T98細胞類似產(chǎn)品：：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞

HIC Cell|人小腸癌細胞

HNE2細胞類似產(chǎn)品：：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞

MDA-MB468細胞類似產(chǎn)品：：MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞

NIH 3T3細胞類似產(chǎn)品：：AR42J細胞、KYSE-150細胞、RPMI-2650細胞

HUC-1細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞

149 PT細胞類似產(chǎn)品：：Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞

NCTC-929細胞類似產(chǎn)品：：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞

NCTC-929細胞類似產(chǎn)品：：SW1417細胞、HGSMC細胞、HO8910PM細胞

NCIH2029細胞類似產(chǎn)品：：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞

AR41P細胞類似產(chǎn)品：：SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞

NCI-H1666細胞類似產(chǎn)品：：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞

OSC-19細胞類似產(chǎn)品：：BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞

Jeko1細胞類似產(chǎn)品：：Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞

VP229細胞類似產(chǎn)品：：SW-1222細胞、HUT 226細胞、OCM-1A細胞

NCIH889細胞類似產(chǎn)品：：LS180細胞、SK-HEP-1細胞、FHL 124細胞

BNL-HCC細胞類似產(chǎn)品：：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞

BMF細胞類似產(chǎn)品：：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞

BGC823細胞類似產(chǎn)品：：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞

HIT T-15細胞類似產(chǎn)品：：CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞

U-138MG細胞類似產(chǎn)品：：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞

OCI-Ly8細胞類似產(chǎn)品：：FRTL5細胞、LCMS細胞、NCI-H69細胞

H1650_CO細胞類似產(chǎn)品：：SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞

NK92細胞類似產(chǎn)品：：HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞

Ej138細胞類似產(chǎn)品：：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞

Anip[973]細胞類似產(chǎn)品：：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞

SU.86細胞類似產(chǎn)品：：TCam-2細胞、IGROV1細胞、HPAF-I細胞

COLO-16細胞類似產(chǎn)品：：OUMS27細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、SW900細胞

Saos2細胞類似產(chǎn)品：：BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞

H-1436細胞類似產(chǎn)品：：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞

SVGp12細胞類似產(chǎn)品：：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞

HIC Cell|人小腸癌細胞

WM266-4細胞類似產(chǎn)品：：MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞

OCI-Ly 1細胞類似產(chǎn)品：：TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞

CWR-22rv1細胞類似產(chǎn)品：：H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞

NIH:OVCAR-4細胞類似產(chǎn)品：：HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞

HUT-125細胞類似產(chǎn)品：：HEL-92_1_7細胞、hTERT-RPE-1細胞、VeroE6細胞

MEG01細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞

GA-10(Clone 4)細胞類似產(chǎn)品：：hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞

SKOV3細胞類似產(chǎn)品：：MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞

Clone 15 HL-60細胞類似產(chǎn)品：：Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞

FF-WT-BJ細胞類似產(chǎn)品：：hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞

PLA801D細胞類似產(chǎn)品：：P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞

Henrietta Lacks cells細胞類似產(chǎn)品：：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞

HPF細胞類似產(chǎn)品：：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞

Epstein-Barr-1細胞類似產(chǎn)品：：HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞

GDM-1細胞類似產(chǎn)品：：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞

NSC-34細胞類似產(chǎn)品：：CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞

Mv1Lu細胞類似產(chǎn)品：：P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞

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