"A-9 Cell|小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：皮下結(jié)締組織；自發(fā)永生；雄性；C３H/An

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

COS1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pa14C細(xì)胞、H-1373細(xì)胞、YT細(xì)胞

OEC33細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZR-75-1細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞

Hca-F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARO81細(xì)胞、OCM-1A細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞

GP2-293細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AM38細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞

SUD-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OC-316細(xì)胞、C 6細(xì)胞、L6565細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

A-9 Cell|小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞GAO出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提GAO懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，ZuiHAO選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到Zui低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良HAO的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。

SCaBER細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞

NCI-H2172細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞

PLB985細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞

H-II-E-C3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

SCaBER細(xì)胞類似產(chǎn)品：：QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞

NCI-H2172細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞

PLB985細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞

H-II-E-C3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無(wú)限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞在分離時(shí)核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個(gè)階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長(zhǎng)率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個(gè)多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個(gè)方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個(gè)基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長(zhǎng)，同時(shí)也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(huì)(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動(dòng)子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

H-7721細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TSU-Pr1細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞

Hs863T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞

CHOS細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MCF 7細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞

A375-S2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞、C8166細(xì)胞

HEK-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HCC0366細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞、Namalva細(xì)胞

TK-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞

CHL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Panc-03.27細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞

NCI-H69C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞

NCI H716細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞

BT-325細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU601細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞

A-9 Cell|小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

PG-BE1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞

H-1623細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞

LS-411N細(xì)胞類似產(chǎn)品：：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞

NCI-H1876細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞

HCC1806細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA420細(xì)胞、GM03569細(xì)胞、COV-434細(xì)胞

NCI.H522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞

NCI.H522細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞

Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞

NCC-IT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞

S37細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞

Kit-225細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PLC8024細(xì)胞、ST486細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞

HGE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs343T細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、A-2058細(xì)胞

P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SW 1088細(xì)胞、Alexander細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞

KOSC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TALL-104細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞

Pro-5WgaRI3C細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞

HuNS1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HHFK細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞、ACHN細(xì)胞

SKMEL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞

CHP-126細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OKT 3細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞

S.B.細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEL7402細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞、DU 145細(xì)胞

NIE 115細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞

Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NP69SV40T細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞

SG231細(xì)胞類似產(chǎn)品：：K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞

LNCaP clone FGC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、H2330細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞

Nb2a細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞

BaF3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ECV304細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞、H-1437細(xì)胞

SK-GT-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞

NKT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞

VMCUB1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞

H-1385細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞

A-9 Cell|小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞

NCI-H1876細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-647細(xì)胞、RBL細(xì)胞、RKO細(xì)胞

H-2066細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCA433_Bast細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞

NCI-H187細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RCK8細(xì)胞、Y 1細(xì)胞、HEK-293H細(xì)胞

ME-180細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞

MGH-UI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞

H-2122細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SF126細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TF1細(xì)胞

B16 BL6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞

KTA7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NuTu-19細(xì)胞、M07e細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞

NOR-10細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ROS-17/2.8細(xì)胞、H146細(xì)胞、SKNFI細(xì)胞

Hs-281-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞

EoL-1-cell細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞

OVCAR-4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：WML2細(xì)胞、MBT2細(xì)胞、H-2591細(xì)胞

Ly1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞

D-341 Med細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR8/ADR細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞

WERI細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞

LK-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RAEC細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞、A1847細(xì)胞

NCTC1469細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞

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