"2V6.11 Cell|人胚腎細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞點(diǎn)說明書，包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細(xì)胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天ZuiHAO更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞Zui大的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時; 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。

細(xì)胞生長：貼壁

JKT-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞

HCT116/L細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC 1005細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞

EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Okayama University Medical School-27細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞

TE353.SK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Calu-3細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞

TE-12細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MOLM16細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

2V6.11 Cell|人胚腎細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)時分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實驗，細(xì)胞鋪板大概是我們Zui常見的一個實驗。但有時候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太GAO）直接接入，移液器不需完全打到Zui大，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不HAO），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個孔加入少量無血清培養(yǎng)基，晃動浸潤整個孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤孔底，其它孔依此類推，這樣整個孔底都是濕潤的，細(xì)胞懸液會平鋪在整個孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺靜置一下。這個方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板HAO掌握，效果沒有96孔板HAO。培養(yǎng)瓶里面加HAO細(xì)胞以后(比如傳代HAO/分HAO細(xì)胞以后)，先順時針搖晃3次，馬上逆時針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動3次。

MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞

NWA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞

NCI-H2135細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞

HSC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞類似產(chǎn)品：：P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、FLS細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞

NWA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞

NCI-H2135細(xì)胞類似產(chǎn)品：：DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞

HSC2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

SUM-159PT細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs683細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞

KMM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：RMS1598細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞

KMST6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞

HBE細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-446細(xì)胞、RL細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞

LNCaP-FGC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞

BC-PAP細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞

AHH-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Be Wo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞

CWR22-R1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞

CCD1095Sk細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H711細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞、MM134細(xì)胞

SW-1463細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞

2V6.11 Cell|人胚腎細(xì)胞

MCF-12A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LSC-1細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞、EB-2細(xì)胞

MB157細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞

HSC-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞

NCI-H1299細(xì)胞類似產(chǎn)品：：COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞

Wien-133細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞

CHP 100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞

CHP 100細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞

MMVECs細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞

CAL39細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-UT-1細(xì)胞、RBE細(xì)胞、BT-20細(xì)胞

HFE-145細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VSMC細(xì)胞、H1876細(xì)胞、T 84細(xì)胞

NKM1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ECC 10細(xì)胞、RD-2細(xì)胞、766T細(xì)胞

Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞

AMC-HN-8細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞

SCC 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞

U118細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞

HCA7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞

HCPEpiC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PT-67細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞

EJ1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUDHL2細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞

HEK-293-EBNA細(xì)胞類似產(chǎn)品：：32Dcl3細(xì)胞、Bac 1.2F5細(xì)胞、BALB/3T3 clone A31細(xì)胞

H-2171細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2030細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞

MDA-MB-468細(xì)胞類似產(chǎn)品：：V79-4細(xì)胞、H82細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞

J774 A1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 895.T細(xì)胞、C-26細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞

Ly3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞

KYSE 140細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞

BAC1.2F5細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞

WRL-68細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞

H441細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HHL5細(xì)胞、H748細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞

SK-N-SH細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞、STC-1細(xì)胞

MDA-MB-453細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2444細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、HS-729細(xì)胞

2V6.11 Cell|人胚腎細(xì)胞

YD-15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ketr3細(xì)胞、NSC34細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞

OC-316細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞

U-251細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞

P19細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞

NCIH2141細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞

SNU-182細(xì)胞類似產(chǎn)品：：B-104細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞

C-643細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞

LN 382細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SK-N-FI細(xì)胞、T98G細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞

Caco-2/ATCC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1944細(xì)胞、R D細(xì)胞、SUD4細(xì)胞

Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞類似產(chǎn)品：：C3H/10T1/2細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞

MC-CAR細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞

MOLT 4細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞

Human Embryo Lung-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-1437細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞

Hep G2/C3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞

P30OHK細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞

MV411細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC7細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、PFSK細(xì)胞

JG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SCC9細(xì)胞、High5細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞

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