"TU 686 Cell|人喉癌細胞

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細胞和分化征。傳代細胞形成細胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細胞消化時間相對延長。

細胞生長：貼壁

RH7777細胞類似產(chǎn)品：：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞

HS-940-T細胞類似產(chǎn)品：：Hs940-T細胞、OCI-Ly7細胞、UMC-11細胞

CAL-62細胞類似產(chǎn)品：：mRMEC細胞、JHH2細胞、Hs 729細胞

SKCol1細胞類似產(chǎn)品：：AtT 20細胞、ARO 81-1細胞、NCI-H1184細胞

RMC細胞類似產(chǎn)品：：KYSE140細胞、H-2291細胞、COLO 738細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

TU 686 Cell|人喉癌細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不HAO》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

FM-88細胞類似產(chǎn)品：：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞

NCI-SNU-C2A細胞類似產(chǎn)品：：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞

DMS-114細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞

Hca-F細胞類似產(chǎn)品：：ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

FM-88細胞類似產(chǎn)品：：KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞

NCI-SNU-C2A細胞類似產(chǎn)品：：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞

DMS-114細胞類似產(chǎn)品：：MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞

Hca-F細胞類似產(chǎn)品：：ARO81細胞、RASMCs細胞、SK Mel 2細胞

細胞生長特性：貼壁生長　

細胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細胞系。嚙齒類動物細胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細胞系。目前認為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進一步突變的機會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細胞樣細胞；SV40 LT用于黏附細胞，如成纖維細胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細胞和其他一些細胞。

BERH-2細胞類似產(chǎn)品：：MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞

C8161細胞類似產(chǎn)品：：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞

NCI-H196細胞類似產(chǎn)品：：NIE-115細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞、L615細胞

T98細胞類似產(chǎn)品：：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞

Karpas422細胞類似產(chǎn)品：：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞

L929細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞

MUS-M1細胞類似產(chǎn)品：：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞

UMR106細胞類似產(chǎn)品：：TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞

NBL-2細胞類似產(chǎn)品：：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞

HepG2/C3A細胞類似產(chǎn)品：：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞

TU 686 Cell|人喉癌細胞

RSC 96細胞類似產(chǎn)品：：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞

NCTC929細胞類似產(chǎn)品：：OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞

GM01232細胞類似產(chǎn)品：：Tu212細胞、32D.3細胞、J82 COT細胞

T 98 G細胞類似產(chǎn)品：：FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞

Hs940.T細胞類似產(chǎn)品：：293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞

Experimental Mammary Tumour-6細胞類似產(chǎn)品：：TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞

Experimental Mammary Tumour-6細胞類似產(chǎn)品：：TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞

MOPC細胞類似產(chǎn)品：：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞

L-132細胞類似產(chǎn)品：：CAL851細胞、EVSA/T細胞、OCI/AML5細胞

H647ell細胞類似產(chǎn)品：：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞

EC-109細胞類似產(chǎn)品：：HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞

HepG2-luc細胞類似產(chǎn)品：：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞

CAL-78細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞

SIRC細胞類似產(chǎn)品：：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞

VERO76細胞類似產(chǎn)品：：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞

Panc_05_04細胞類似產(chǎn)品：：JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞

JF305細胞類似產(chǎn)品：：HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞

MCF-7/ADR-RES細胞類似產(chǎn)品：：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞

A375SM細胞類似產(chǎn)品：：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞

HBMEC細胞類似產(chǎn)品：：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞

QGP 1細胞類似產(chǎn)品：：H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞

HTh-74細胞類似產(chǎn)品：：Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞

BC-023細胞類似產(chǎn)品：：PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞

HITT15細胞類似產(chǎn)品：：CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞

LS174T細胞類似產(chǎn)品：：Rat Lung-65細胞、Ra #1細胞、P3/X63/Ag8細胞

SNG-M細胞類似產(chǎn)品：：SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞

GEO細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞

Kit 225-K6細胞類似產(chǎn)品：：3T3-F442A細胞、PIEC細胞、SK-MEL-3細胞

HK2細胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞

TU 686 Cell|人喉癌細胞

HMEL細胞類似產(chǎn)品：：Strain V細胞、HEK 293A細胞、H1184細胞

U-373MG細胞類似產(chǎn)品：：Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞

MGc80-3細胞類似產(chǎn)品：：Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞

MCF 7細胞類似產(chǎn)品：：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞

253JBV細胞類似產(chǎn)品：：BT549細胞、Hs 578.T細胞、BJ [Human fibroblast]細胞

Glioma-261細胞類似產(chǎn)品：：BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞

NCI H226細胞類似產(chǎn)品：：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞

Raji細胞類似產(chǎn)品：：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞

VM-CUB-1細胞類似產(chǎn)品：：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞

MIMVEC細胞類似產(chǎn)品：：A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞

LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞類似產(chǎn)品：：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞

GM-637細胞類似產(chǎn)品：：BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞

NBL-2細胞類似產(chǎn)品：：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞

ETCC007細胞類似產(chǎn)品：：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞

L細胞類似產(chǎn)品：：PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞

SW 1222細胞類似產(chǎn)品：：H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞

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