"TU 686 Cell|人喉癌細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握HAO細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過GAO時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。

細(xì)胞生長：貼壁

RH7777細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞

HS-940-T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hs940-T細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞

CAL-62細(xì)胞類似產(chǎn)品：：mRMEC細(xì)胞、JHH2細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞

SKCol1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AtT 20細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞

RMC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KYSE140細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

TU 686 Cell|人喉癌細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不HAO、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不HAO》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，ZuiHAO經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。

FM-88細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM H-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞、N1E115細(xì)胞

NCI-SNU-C2A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞

DMS-114細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB-231細(xì)胞、253J細(xì)胞、293AD細(xì)胞

Hca-F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARO81細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫

FM-88細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KM H-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞、N1E115細(xì)胞

NCI-SNU-C2A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞

DMS-114細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MDAMB-231細(xì)胞、253J細(xì)胞、293AD細(xì)胞

Hca-F細(xì)胞類似產(chǎn)品：：ARO81細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞

細(xì)胞生長特性：貼壁生長　

細(xì)胞系永生化原理介紹：多數(shù)正常細(xì)胞的壽命是有限的，能傳20-100代，但有些細(xì)胞，尤其是來自嚙齒類或來自多數(shù)腫瘤的細(xì)胞，可以產(chǎn)生具有無限壽命的連續(xù)細(xì)胞系。嚙齒類動物細(xì)胞在分離時核型是正常的，在傳到12代左右以后可能出現(xiàn)危相，多數(shù)細(xì)胞在這個階段死亡了，但少數(shù)細(xì)胞存活下來，并擁有了更GAO的生長率，成為連續(xù)細(xì)胞系。目前認(rèn)為永生化是一個多步驟的過程，包括一系列細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)基因(如Rb和p53)失活。目前主要從兩個方向進(jìn)行操作，病毒基因致永生化和端粒酶誘導(dǎo)的永生化，其原理如下：SV40 LT基因常用于誘導(dǎo)永生化。這個基因的產(chǎn)物-T抗原，可與Rb和p53結(jié)合。這樣不僅使細(xì)胞增殖的壽命得以延長，同時也限制了如p53這樣基因的DNA監(jiān)控活性，從而使基因組的不穩(wěn)定性增加，也增加了向永生化發(fā)展的進(jìn)一步突變的機(jī)會(如上調(diào)端粒酶或下調(diào)端粒酶抑制物的活性)。用含可調(diào)節(jié)啟動子的端粒酶基因進(jìn)行轉(zhuǎn)染，足以形成永生化細(xì)胞。這些基因中已被廣泛應(yīng)用的有：EBV用于淋巴母細(xì)胞樣細(xì)胞；SV40 LT用于黏附細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞(Mayne et al., 1996)、 角質(zhì)形成細(xì)胞(Steinberg,1996) 和內(nèi)皮細(xì)胞(Punchard et al.,1996)等;而hTERT則用于間充質(zhì)干細(xì)胞和其他一些細(xì)胞。

BERH-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞

C8161細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞

NCI-H196細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞

T98細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞

Karpas422細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞

L929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1792細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞

MUS-M1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞

UMR106細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞

NBL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPC-039細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞

HepG2/C3A細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞

TU 686 Cell|人喉癌細(xì)胞

RSC 96細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞

NCTC929細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞

GM01232細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞

T 98 G細(xì)胞類似產(chǎn)品：：FHs74Int細(xì)胞、MLA144細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞

Hs940.T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293 HEK細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞、IGROV細(xì)胞

Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞

Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞

MOPC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞

L-132細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞

H647ell細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞

EC-109細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HRIF細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞

HepG2-luc細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞

CAL-78細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞

SIRC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞

VERO76細(xì)胞類似產(chǎn)品：：AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞

Panc_05_04細(xì)胞類似產(chǎn)品：：JIMT1細(xì)胞、H2172細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞

JF305細(xì)胞類似產(chǎn)品：：HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞

MCF-7/ADR-RES細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PT67細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞

A375SM細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PBMC細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞

HBMEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：LNCaP clone FGC細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞

QGP 1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-35細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞

HTh-74細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Mel-MeWo細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞、YD-15細(xì)胞

BC-023細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PL5細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞

HITT15細(xì)胞類似產(chǎn)品：：CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞

LS174T細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Rat Lung-65細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞

SNG-M細(xì)胞類似產(chǎn)品：：SKMEL5細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞

GEO細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NCI-H1373細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞

Kit 225-K6細(xì)胞類似產(chǎn)品：：3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞

HK2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OCI-Ly 10細(xì)胞、2E8細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞

TU 686 Cell|人喉癌細(xì)胞

HMEL細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Strain V細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、H1184細(xì)胞

U-373MG細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞

MGc80-3細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞

MCF 7細(xì)胞類似產(chǎn)品：：293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞

253JBV細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT549細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞

Glioma-261細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞

Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞

NCI H226細(xì)胞類似產(chǎn)品：：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC78細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞

Raji細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VAESBJ細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞

VM-CUB-1細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞

MIMVEC細(xì)胞類似產(chǎn)品：：A2780細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞、SW-780細(xì)胞

LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H2347細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞

GM-637細(xì)胞類似產(chǎn)品：：BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞

NBL-2細(xì)胞類似產(chǎn)品：：NPC-039細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞

ETCC007細(xì)胞類似產(chǎn)品：：VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞

L細(xì)胞類似產(chǎn)品：：PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞

SW 1222細(xì)胞類似產(chǎn)品：：H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞

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