"TU 686 Cells(贈送Str鑒定報告)|人喉癌細胞

細胞背景資料：詳見相關文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

【細胞培養(yǎng)中支原體、黑蛟蟲、真菌的污染情況總結】支原體：黑色的，HAO象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中Zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢死去。用泰樂菌素，獸用支原體病的藥，但可用于細胞培養(yǎng)，無任何不良反應。如果作為常用的抗生素的話, 建議用８ug/ml的濃度；黑蛟蟲：可以穿透濾膜，也可以通過空氣傳播，低倍下為黑色點狀，GAO倍下可看見黑色的小蟲游來游去，培養(yǎng)液也是不渾的，一般不會太影響，細胞還是可以用的。常常是細胞生長狀態(tài)良HAO，且觀測到的運動物無明顯增多，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化，可在同一批號的血清養(yǎng)的細胞中發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須殊處理。建議如果細胞有可能是此種污染的話，可以增加細胞的種板密度，以提GAO細胞的生存率；真菌：一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細胞碎片分不清，慢慢的會長出很細的黑色絲狀物。真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了，也很難救活了。

細胞生長：貼壁

C4 I細胞類似產品：：Alexander cells細胞、CWR-22rv1細胞、CC-LP-I細胞

HK-2 [Human kidney]細胞類似產品：：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞

KYSE450細胞類似產品：：NALM 6細胞、HEK293FT細胞、KMBC細胞

HuH 6細胞類似產品：：UACC812細胞、OE19細胞、NCI-SNU-601細胞

CL34細胞類似產品：：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞

TU 686 Cells(贈送Str鑒定報告)|人喉癌細胞

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

[細胞產品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

收到常溫復蘇細胞后，具體操作步驟1)首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完HAO，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。2)用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。3)仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。4)靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。5)貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。6)懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。溫馨提醒：1)可將培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基轉移至50ml無菌離心管中，備用；細胞首次傳代時，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。2)確認細胞狀態(tài)良HAO后，應及時將部分細胞凍存，再進行后續(xù)的實驗，避免后期實驗失誤可能發(fā)生細胞污染或死亡而導致的細胞丟失，影響后續(xù)實驗。建議客戶收到細胞后前3天，100X、200X、400X各拍3張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于后續(xù)和技術支持溝通交流。

細胞傳代方法：１：２傳代

MESSA細胞類似產品：：M109細胞、KYSE-70細胞、L1210細胞

EB-3細胞類似產品：：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞

3AO細胞類似產品：：TH1細胞、H711細胞、RN細胞

Functional Liver Cell-7細胞類似產品：：OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞

TE85細胞類似產品：：tdott細胞、NCIH208細胞、Hs 840.T細胞

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

TU 686 Cells(贈送Str鑒定報告)|人喉癌細胞

細胞生長特性：貼壁生長　

CCD 841 CoN細胞類似產品：：SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞

QGY-7703細胞類似產品：：FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞

NCI-HUT-125細胞類似產品：：Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞

Swiss3T3細胞類似產品：：3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞

H-716細胞類似產品：：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞

Malme3M細胞類似產品：：NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞

細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記HAO細胞名稱和凍存日期，同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝HAO細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐)ZuiHAO;或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，ZuiHAO取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結構，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更HAO。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣GAO壓消毒)，２mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天ZuiHAO換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記HAO細胞名稱和凍存日期，同時作HAO登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝HAO細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，Zui后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，ZuiHAO取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。

HGMC細胞類似產品：：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞

HCT15細胞類似產品：：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞

Jurkat (clone E6-1)細胞類似產品：：SW756細胞、CEM-CCRF (CAMR)細胞、MOLT-16細胞

H647ell細胞類似產品：：SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞

SW-839細胞類似產品：：OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞

SCL I細胞類似產品：：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞

JURKAT E-6.1細胞類似產品：：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞

SK RC 52細胞類似產品：：RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞

MDA-MB-361細胞類似產品：：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞

DV-90細胞類似產品：：Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞

H1651細胞類似產品：：OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞

Ramos 2G6 4C10細胞類似產品：：PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞

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TERT-RPE1細胞類似產品：：HT-55細胞、GM00637I細胞、H4-II-E細胞

NCIH1395細胞類似產品：：C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞

Tu 177細胞類似產品：：KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞

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SGC7901細胞類似產品：：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞

Clone 929細胞類似產品：：Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞

SUM149細胞類似產品：：KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞

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COR-L105細胞類似產品：：HSC1細胞、NCIH1435細胞、Tca-8113細胞

BE(2)-C細胞類似產品：：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞

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SNU1040細胞類似產品：：16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞

H4-II-E-C3細胞類似產品：：Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞

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Panc-10.05細胞類似產品：：OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞

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