"D407 Cell|人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

解凍細(xì)胞常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問(wèn)題，究竟是什么原因?qū)е拢覀冊(cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專(zhuān)家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問(wèn)題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過(guò)程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠GAO，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過(guò)程中的問(wèn)題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開(kāi)始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過(guò)敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的Zui佳條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍Zui近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

NCI-H1869細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LS-1034細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞

MFE-280細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HSAS3細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞

Rat 2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：AR4IP細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞、HS940細(xì)胞

SW 1222細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2029細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞

KCL22細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

D407 Cell|人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)更HAO經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很HAO，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿(mǎn)培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問(wèn)題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿(mǎn)的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過(guò)離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過(guò)上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問(wèn)題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過(guò)90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很HAO時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類(lèi)型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。

MDA-MB-361細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LICR-LON-HN6細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞

MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞

LIPF155C細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DMS-114細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞

SNU-520細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-1648細(xì)胞、H-460細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２傳代

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

MDA-MB-361細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LICR-LON-HN6細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞

MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞

LIPF155C細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DMS-114細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞

SNU-520細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-1648細(xì)胞、H-460細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)　

細(xì)胞培養(yǎng)中的污染分為兩類(lèi)，化學(xué)污染和生物污染；生物污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。細(xì)菌、霉菌和酵母到處存在，它們能在合適的環(huán)境中非?？焖俚纳L(zhǎng)。這些污染比較容易觀察到，它們往往會(huì)使其污染的培養(yǎng)液產(chǎn)生可見(jiàn)的變化，或者通過(guò)顯微鏡觀察就可以看見(jiàn)。由于病毒有種屬異性，所以病毒污染的概率比較小。但是病毒污染難于發(fā)現(xiàn)，因?yàn)椴《绢w粒別微小，一般的實(shí)驗(yàn)室都沒(méi)能力檢查細(xì)胞培養(yǎng)中污染的病毒。由于病毒一般潛伏在細(xì)胞內(nèi)，對(duì)整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)不是致死的，所以它可能會(huì)使研究人員長(zhǎng)期得到受病毒影響的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1956年Robinson及其同事首次發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染。90年代初的一個(gè)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在美國(guó)培養(yǎng)的細(xì)胞中，至少有15%被支原體污染。由于支原體沒(méi)有細(xì)胞壁，在細(xì)胞培養(yǎng)液中幾乎是透明的，同時(shí)對(duì)常用于細(xì)胞培養(yǎng)中的抗生素不敏感，不引起pH變化，不使培養(yǎng)液渾濁，所以支原體污染不容易被發(fā)現(xiàn)，但是其存在會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。培養(yǎng)多種細(xì)胞時(shí)操作不當(dāng)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的交叉污染。由于不同細(xì)胞的生產(chǎn)速率不同，污染的生長(zhǎng)速率快的細(xì)胞終會(huì)完全取代被污染的細(xì)胞。

RPMI.8226細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH250細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞

HCC70細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞

NCIH1869細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H2.35細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞

SUM-102細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-1651細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞

CAL 33細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞

FaDu細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Farage細(xì)胞、D-407細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞

SCC15細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞

P3J細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SW48細(xì)胞、P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞

LLC細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞

RL95細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MMVECs細(xì)胞、P30/0HK細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞

D407 Cell|人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

MDA330細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Pt K2細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞

SUP-T1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：N-2a細(xì)胞、A-431細(xì)胞、SN12C細(xì)胞

SJ-RH30細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞

Hs 746T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：APRE-19細(xì)胞、KHYG1細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞

KRC/Y細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：VMM5細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞

HuH7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL-120細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞、M 1細(xì)胞

HuH7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CAL-120細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞、M 1細(xì)胞

Hs 739.T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞

SY5Y細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞

BPH-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H711細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞

OS-732細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞

tdott細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PANC0813細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞、U-2932細(xì)胞

PLC PRF 5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RLE-6TN細(xì)胞、U-2932細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞

SMMC 7721細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：EBNA293細(xì)胞、NCIH1792細(xì)胞、H2347細(xì)胞

SUM190PT細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PLA-801C細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞

HEK 293 EBNA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞

MZCRC1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞

NCI-H250細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-295細(xì)胞、H1341細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞

CAOV3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞

EA.hy 926細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RAMSCs細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞、HEI-193細(xì)胞

A2780/CP細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HGC-27細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞

BL6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞

LA4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：293/EBNA-1細(xì)胞、NS1細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞

SU-DHL-8細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞

H1755細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞

MDA-MB 453細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞

SF539細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：K562細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞

MCF 7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞

CATHa細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KMB17細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞

D407 Cell|人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

MO59J細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞

EC-GI細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞

H-1836細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞

DMS273細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞

H498細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞

NCI-H1048細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞

T-T細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CWR22-Rv1細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞、SBC-5細(xì)胞

Eca-109細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞

GM01232E細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞

TFH細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RAW 264.7細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞

SuDHL 5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞

SW-962細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H2126細(xì)胞、Jiyoye (P-2003)細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞

CCC-HIE-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HEK293EBNA細(xì)胞、293 H細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞

SUM 159細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：C8-D1A細(xì)胞、IALM細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞

EnCa1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞

MDA MB 436細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞

786-O細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞

"