"D407 Cell:人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
D-341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7細胞、OC-316細胞、HEK293-H細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
D407 Cell:人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié):支原體(mycoplasma)污染的細胞,是否能以肉眼觀察出異狀?不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株,無法以其外觀分辨之;支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響?支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù),代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前,必須確認細胞為mycoplasma-free,實驗結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義;偵測出細胞株有支原體污染時,該如何處理?直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細胞株;CO2培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之;為何培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值;購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;收到之冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞
CO115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
A2780/CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC-27細胞、Hs-746T細胞、SNU-601細胞
細胞生長特性:貼壁生長
D407 Cell:人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
MDA-MB-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
MUS-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
CAL-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞
PTK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
D407 Cell:人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
U 266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-4細胞、AML-EOL-1細胞、HCS-2/8細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
alpha-TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞
NCI747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
RWPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞
RWPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞
CMT64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
JURKAT E-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-4細胞、WM-2664細胞、HNEpC細胞
343 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞
BNL CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞
DHL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、Hu-P-T4細胞、SBC5細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
SK-N-BE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
Mv 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
NCI-H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
B16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-08.13細胞、CCD33Co細胞、Panc-8_13細胞
NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
HCC1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
Mouse Forestomach Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞
SW-403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞
NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
CAL 85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
CC-LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞
CC-LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞
H-4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
WB F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
D407 Cell:人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
LM-TK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
JROECL19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞
HCT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
EAhy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
TMD8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細胞、S180細胞、H35細胞
PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
Farage細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞
SK-CO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1734細胞、NCI-H1437細胞、CV 1細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2444細胞、H1184細胞、CMT.64細胞
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