熒光染料的優(yōu)點：
使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。
總的來說，SYBR Green I方法是一種最基礎也最常用的Real-time qPCR實驗手段。
| 產(chǎn)品名稱 |
海藻巴斯德菌探針法熒光定量PCR試劑盒 |
| 英文名稱 |
Pasteurella trehalosi |
| 貨號 |
XGR97082 |
熒光化學物質(zhì)：
實時熒光定量PCR所使用的熒光物質(zhì)可分為兩種：熒光探針和熒光染料。現(xiàn)將其原理簡述如下：
1. TaqMan熒光探針：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5'－3'外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。而新型TaqMan-MGB探針使該技術(shù)既可進行基因定量分析，又可分析基因突變（SNP），有望成為基因診斷和個體化用藥分析的首選技術(shù)平臺。
2. SYBR熒光染料：在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料非特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。SYBR僅與雙鏈DNA進行結(jié)合，因此可以通過溶解曲線，確定PCR反應是否特異。
3. 分子信標：是一種在5和3末端自身形成一個8個堿基左右的發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)雙標記寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補配對，導致熒光基團與淬滅基團緊緊靠近，不會產(chǎn)生熒光。PCR產(chǎn)物生成后，退火過程中，分子信標中間部分與特定DNA序列配對，熒光基因與淬滅基因分離產(chǎn)生熒光 。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括絕對定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人Ⅹ型膠原(COL10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 別稱:COL10A1, COL10-A1, Collagen Alpha-1(X) chain Human COL10(Collagen Type Ⅹ) ELISA Kit 用途 該試劑盒用于體外定量檢測Human 血清，血漿或其他生物體液中天然及部分重組COL10濃度
Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit 100 rxns cDNA文庫和文庫構(gòu)建
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Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit, with dsDNase 20 rxns cDNA文庫和文庫構(gòu)建
Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit, with dsDNase 100 rxns cDNA文庫和文庫構(gòu)建
輔助噬菌體VCSM130 ul/支Ganciclovir8242更昔洛韋
噬菌粒pcomb3XSSng/ul，ulFurosemide541
pcomb3XSS展示系統(tǒng)Furazolidone675呋喃唑酮
兔源Fab重組抗體引物系統(tǒng)套/盒Fumaric acid17
兔源scFv重組抗體引物系統(tǒng)套/盒Fudosteine131898福多斯坦
7α-Hydroxystigmasterol 中文名：7α-羥基豆甾醇 分子式：C29H48O2 度：% 兔半胱酸蛋白酶抑制劑C 英文名稱： Rabbit Cystatin C 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： CSTC
Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol 中文名： 分子式：C29H50O3 度：93.0% 兔基質(zhì)金屬蛋白酶-12(rabbit MMP-12) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
Sitosteryl palmitate 中文名：β-谷甾醇棕櫚酸酯 分子式：C45H80O2 度：90.0% 兔基質(zhì)金屬蛋白海藻巴斯德菌探針法熒光定量PCR試劑盒酶-13(rabbit MMP-13) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
22-Dehydroclerosterol glucoside 中文名： 分子式：C35H56O6 度：% 兔基質(zhì)金屬蛋白酶-3(rabbit MMP-3) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
22-Dehydroclerosterol 中文名：22-去氫赤桐甾醇 分子式：C29H46O 度：94.0% 兔基質(zhì)金屬蛋白酶-9(rabbit MMP-9) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
關鍵字： 海藻巴斯德菌探;探針法;熒光定量PCR試劑盒;Pasteurella trehalos;XGR97082;
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