注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準
FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白5-甲酰水楊酸5-Formylsalicylic acid質量規(guī)格:>97%
B16-F10(小鼠皮膚色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人小神經膠質細胞HM阿脲Alloxan, monohydrate質量規(guī)格:>98%,進分
人肺動脈成纖維細胞總RNAHPAF NA檸檬酸二銨,檸檬酸氫二銨Ammonium , dibasic質量規(guī)格:>99%,AR
CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細胞裂解液 (陽性對照) 乳酸鈣五水(>98%,USP)Calcium (L)-lactate, pentahydrate質量規(guī)格:>98%,USP
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS32'-脫氧胸苷-5'-一1酸二鈉鹽dTMP, 2'-Deoxythymidine-5'-monophosphate di salt質量規(guī)格:>97%,分子生物學級
人臍帶間充質干細胞HUMSC辛標準溶液(100μg/ml,u=4%)質量規(guī)格:100μg/ml,u=4% Phoxim solution
猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6A 膠質瘤細胞,SHG44細胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤細胞)辛標準溶液(10μg/ml,u=6%)質量規(guī)格:10μg/ml,u=6%Phoxim solution
EB病毒轉化的人B細胞;KMY1002甲基橙(IND)質量規(guī)格:INDMethyl orange
NOG Others Human 人 Noggin / NOG 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲基紅鈉鹽(IND)質量規(guī)格:INDMethyl Red salt
CM-R037大鼠小腸隱窩上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL甲基紅鈉鹽(ACS reagent,95 %)質量規(guī)格:ACS reagent,95 %Methyl Red salt
PK15-EGFP-puro(慢病毒構建穩(wěn)定株)豬腎上皮細胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin萊苞迪甙A質量規(guī)格:>98%,BRRebaudioside A
IL13 Protein Human 重組人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 標簽)萊苞迪甙A(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Rebaudioside A
人肺動脈平滑肌細胞(HPASMC) ( 5×105 ) RDFs, 大鼠真皮成纖維細胞 Rattus環(huán)亮氨酸甲酯鹽酸鹽質量規(guī)格:>98%Cycloleucine Methyl Ester.HCl
兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2水溶性四氮唑-3質量規(guī)格:BRGLT003
IL27 Others Mouse 小鼠 IL27 / Ierleukin-27 人細胞裂解液 (陽性對照) 表兒茶素沒食子酸酯(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品(−)-Epicatechin gallate/ECG
SMR3B Others Human 人 SMR3B 人細胞裂解液 (陽性對照) 馬尿酸-L-本酸shēng huà shì jì容量:保存:-20℃25毫克
CL-0029B16(小鼠色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2變色素2R Chromotrope 2R 4197-7-3 1G 通用試劑
H4細胞,人腦神經膠質瘤細胞 人大動脈平滑肌細胞,HASMC細胞 正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F酪蛋柏胨 IRON PqPTONcTq 91079-40-
BSC-1(猴腎細胞) 5×106cells/瓶×2N-乙酰-D-基葡萄糖shēng huà shì jì容量:RT25克
COMP Others Human 人 COMP 人細胞裂解液 (陽性對照) 12501-23-41鎢酸Phosphotungstic acid
操作流程:
FOR Complement C4-A ELISA Kit(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。