IMDM(含雙抗)密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代(傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定),狀態(tài)穩(wěn)定,便于穩(wěn)定生長。1儲存:液氮。(2)運輸:干冰。(3)用途:只可用于科研。(4)第二代培養(yǎng)末期液氮凍存。(5)每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。 IMDM(含雙抗)這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。IMDM(含雙抗)如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。
如何選用培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,*MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng),各種目的無血清培養(yǎng)的*是AIM V培養(yǎng)基(SFM)。在開始進行新的細胞培養(yǎng)時。
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