mRNA提取試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn)
構(gòu)建cDNA文庫、蛋白質(zhì)的體外翻譯和RT-PCR方法檢測(cè)稀有的mRNA等研究常
常需要從總RNA中分離mRNA，mRNA只占總RNA的1%左右，但由于帶poly(A)尾
巴，所以可以通過與Oligo(dT)的親和結(jié)合而與其他RNA（如rRNA、tRNA等）分離
開。其原理如下：
mRNA提取試劑盒本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn)：
1. 直接從總RNA中提取mRNA，即開即用，非常方便。
2. 處理量大，一次可以處理10 μg 總RNA。
3. 操作簡單，只需要離心就可以完成，免去了灌柱、洗柱等麻煩。
4. 得到的mRNA可以直接用于構(gòu)建cDNA文庫、蛋白質(zhì)的體外翻譯和RT-PCR。
使用及效果
將0.5 mL結(jié)合液加入到一管裝有1 mg Oligo(dT)纖維素的離心管中，放置5
分鐘后離心吸棄上清后待用。將制備的總RNA 100 μL加熱到65℃ 5分鐘后加入等
體積的結(jié)合液，轉(zhuǎn)移到裝有Oligo(dT)纖維素的離心管中，顛倒混勻數(shù)次，離心后
將上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)離心管中。用0.5 mL結(jié)合液，混勻后4℃ 200 g 離心5分鐘，
小心棄上清。重復(fù)上步洗3-5次，用RNase-free水洗脫mRNA，用微量核酸沉淀
劑沉淀回收mRNA。