抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱
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3號染色體開放閱讀框49抗體
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英文名稱
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Anti-C3orf49
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規(guī)格
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0.2ml/200μg
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產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200 IEM=1:20-200 IGS=1:20-200 GICA=1:20-200
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-C3orf49
中文名稱 3號染色體開放閱讀框49抗體
別 名 chromosome 3 open reading frame 49; MGC17310; CC049_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 33kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C3orf49
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是3號染色體開放閱讀框49抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
碘他拉標(biāo)準(zhǔn)品Rat CD23 ELISA Kit純度:0.994
碘普羅標(biāo)準(zhǔn)品Rat CD163 ELISA Kit純度:0.979
碘帕標(biāo)準(zhǔn)品Rat CD14 ELISA Kit純度:0.99
碘海標(biāo)準(zhǔn)品Rat CCL7 ELISA Kit純度:0.99
碘代對二標(biāo)準(zhǔn)品Rat CCL3 ELISA Kit純度:0.995
碘克沙標(biāo)準(zhǔn)品Rat CCL26 ELISA Kit純度:0.988
膽影標(biāo)準(zhǔn)品Rat CCL24 ELISA Kit純度:0.977
rabbit Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISA Kit兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒特價促銷規(guī)格:96T/48T99%Sesamol芝麻酚規(guī)格:
rabbit Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒特價供應(yīng)規(guī)格:96T/48T≥98%Sesamin芝麻素規(guī)格:
rabbit Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA Kit兔子Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T≥98%Timosaponin A-Ⅲ知母皂苷A-Ⅲ規(guī)格:
rabbit N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T97%anemarsaponin B知母皂苷BⅡ規(guī)格:
rabbit procollagen Ⅲ N-terminal peptide,PⅢNT ELISA Kit 兔子Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒特價促銷規(guī)格:96T/48T≥98%Resibufogenin酯蟾毒配基規(guī)格:
Rabbit coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA Kit 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒特價供應(yīng)規(guī)格:96T/48T≥94%Chonglou saponin I重樓皂苷I規(guī)格:
Linalool,97%通用試劑 25ML
Corn steep liquor通用試劑 500G
(?)-Bornyl acetate,97%通用試劑 25G
Pyridinium p-toluenesulfonate,≥99.0%通用試劑 5G
1,2-Dichloroethylene,98%通用試劑 25ML
2-Sulfobenzoic acid,98%通用試劑 25G
12-Crown-4,98%通用試劑 1G
Benzo-18-crown-6,98%通用試劑 1G
Tetraethylene Glycol Di-p-tosylate,97%通用試劑 10G
2-Bromo-1-ethyl-pyridinium tetrafluoro...通用試劑 5G
Bromotris(dimethylamino)phosphonium he...通用試劑 1G
Pyrophosphoric acid,≥90%通用試劑 50G
PHYTIN通用試劑 25G
2,2,4-Trimethyl-1,3-pentanediol,97%通用試劑 50G
Docetaxel,99%通用試劑 25MG
3號染色體開放閱讀框49抗體 Armillaria│borealis Marxm. & Korhonen種屬:Armillaria│borealis Marxm. & Korhonen
分離基物:樺樹
提供形式:斜面培養(yǎng)物
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:14
生長條件:24
存儲條件:定期移植法北方蜜環(huán)菌