"ARIP Cells|人胰腺腫瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
TOV21細胞系相關產品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
YD15細胞系相關產品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞
RGM-1細胞系相關產品:RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞
細胞生長:貼壁
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
ARIP Cells|人胰腺腫瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
RGM-1細胞系相關產品:RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞
hCMEC/D3細胞系相關產品:SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
MyLa 2059細胞系相關產品:B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞
MLMEC細胞系相關產品:U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞
細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;每周2-3次。
有一些細胞是數量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內,培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞上乘形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
ARIP Cells|人胰腺腫瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
NCI-H3255細胞系相關產品:CATH-a細胞、C8166-CD4細胞、H-196細胞
CALU1細胞系相關產品:LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
PAI細胞系相關產品:UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞
HSC-4細胞系相關產品:RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
KBM-5細胞系相關產品:BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞
H-1793細胞系相關產品:ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞
MDCC-MSB1細胞系相關產品:GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
D-341細胞系相關產品:NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
WIL2 Secreting細胞系相關產品:H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
GB1細胞系相關產品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
HA細胞系相關產品:HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞
Hs 606細胞系相關產品:L132細胞、NCI-H2081細胞、NTERA-2 clone D1細胞
ARIP Cells|人胰腺腫瘤細胞系
C8D1A細胞系相關產品:NCIH1930細胞、HELA-GFP細胞、Dunn LM8細胞
U-2-OS細胞系相關產品:AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞
EBNA293細胞系相關產品:HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞
GM04671細胞系相關產品:HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
A-2058細胞系相關產品:U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞
BpRc1細胞系相關產品:hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞
PIG1細胞系相關產品:L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
HMEC-1細胞系相關產品:LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞
HMEC-1細胞系相關產品:LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞
ESC-410細胞系相關產品:HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
GLRK 13細胞系相關產品:IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞
TOG細胞系相關產品:Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞
MH-S細胞系相關產品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
GM02219D細胞系相關產品:RMa-bm細胞、WSU-DLCL2細胞、HFT8810細胞
SUDHL6細胞系相關產品:H841細胞、RAOEC細胞、ATN-1細胞
As-PC1細胞系相關產品:MDA-MB-435-S細胞、U373細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
SW.620細胞系相關產品:GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞
SW 480細胞系相關產品:Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
KNS-42細胞系相關產品:P-388D1細胞、mRMEC細胞、T47-D細胞
SPCA1細胞系相關產品:Hep-G2細胞、DHL-5細胞、CCD 966 SK細胞
MDA468細胞系相關產品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
RF/6A細胞系相關產品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
VSC4.1細胞系相關產品:UCH-1細胞、KE-37細胞、118 MG細胞
MPC 11細胞系相關產品:KLE細胞、H1105細胞、SEG-1細胞
R-1059-D細胞系相關產品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
Hs739T細胞系相關產品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
Mv.1.Lu細胞系相關產品:YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
NCIH187細胞系相關產品:J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
BC3H-1細胞系相關產品:769P細胞、ETCC007細胞、GEO細胞
Hs 683細胞系相關產品:RDES細胞、Hs606細胞、HuH-6細胞
TOV112D細胞系相關產品:MKN7細胞、EB1細胞、HIC細胞
PLCPRF5細胞系相關產品:SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞
SKCO1細胞系相關產品:PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
GES1細胞系相關產品:HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
Det. 562細胞系相關產品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞
HD-LM-2細胞系相關產品:EOC 20細胞、GM04679細胞、FU-MMT-1細胞
HEC-1-B細胞系相關產品:QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
NCIH23細胞系相關產品:mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
A-204細胞系相關產品:COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
CTV1細胞系相關產品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
MV-4:11細胞系相關產品:SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
L 428細胞系相關產品:SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞
130T細胞系相關產品:L 132細胞、HuPT4細胞、F81細胞
B16F0細胞系相關產品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
GM15452細胞系相關產品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
H-727細胞系相關產品:293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
MCF-7細胞系相關產品:MONO-MAC 6細胞、NCIH1436細胞、LS 513細胞
MCF 7細胞系相關產品:293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
HGMC細胞系相關產品:MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
NP-69細胞系相關產品:H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞
HBZY 1細胞系相關產品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
ARIP Cells|人胰腺腫瘤細胞系
HCC94細胞系相關產品:HCC-2218細胞、SW-1222細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關產品:PT67細胞、SMA 560細胞、C32 [Human melanoma]細胞
MDCC-MSB1細胞系相關產品:GA10細胞、SK-RC 42細胞、Sup T-1細胞
L540細胞系相關產品:H1688細胞、SW1990細胞、SSP-25細胞
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