"AAV-293 Cells|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞背景資料:我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株,但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞。 跟HEK293細胞一樣,AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因,當共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒,pAAV-RC, 和E1缺失助質(zhì)粒)時,可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
HCC 38細胞系相關產(chǎn)品:NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
PC3細胞系相關產(chǎn)品:MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
HCC1954細胞系相關產(chǎn)品:MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
細胞生長:貼壁
購買細胞注意事項:1)收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系;2)仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等;3)用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次;4)建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通交流?!炯毎麄鞔僮鞑襟E】一、貼壁細胞傳代:1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi);2)吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞;3)加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用;4)用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡;5)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細胞傳代:1)將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min;2)棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液;3)將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
AAV-293 Cells|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
Line 697細胞系相關產(chǎn)品:HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
H-841細胞系相關產(chǎn)品:SUM 102PT細胞、MES-SA細胞、CEM/0細胞
JROECL 19細胞系相關產(chǎn)品:BI-Mel細胞、KRC Y細胞、HBSMC細胞
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞不行了,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當然會有脾氣的,大家爭取做到因材施教,比如試試下面的“四步消化法”。(以難消化細胞為例),具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍(目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉)。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況把握)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
AAV-293 Cells|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
EFM192C細胞系相關產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
H1694細胞系相關產(chǎn)品:beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
NCI-H1618細胞系相關產(chǎn)品:3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
CZ-1細胞系相關產(chǎn)品:ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當補液時,需避免反復吹打。
HBE135-E6E7細胞系相關產(chǎn)品:WERIRb1細胞、NFS 60細胞、GalK1細胞
NCI-H1618細胞系相關產(chǎn)品:3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
RPMI-8402細胞系相關產(chǎn)品:SuperTube細胞、ABE8.1/2細胞、HDMEC細胞
HT-1080細胞系相關產(chǎn)品:AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
TEC細胞系相關產(chǎn)品:BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
RA-FLSs細胞系相關產(chǎn)品:HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
NCI-H165細胞系相關產(chǎn)品:H69C細胞、MC-4細胞、HPF細胞
CORL26細胞系相關產(chǎn)品:WM-239A細胞、KMS11細胞、MDAPC2B細胞
AAV-293 Cells|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
MB468細胞系相關產(chǎn)品:Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞
FHL 124細胞系相關產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
SKRC-20細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
DLM8細胞系相關產(chǎn)品:TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞
PANC0327細胞系相關產(chǎn)品:3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
G519細胞系相關產(chǎn)品:NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
RCC23細胞系相關產(chǎn)品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
T8細胞系相關產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
T8細胞系相關產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
NL-20細胞系相關產(chǎn)品:RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞
OCILY-10細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
RPMI 1846細胞系相關產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
NIH 3T6細胞系相關產(chǎn)品:CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
LAPC4細胞系相關產(chǎn)品:EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
AMC-HN-8細胞系相關產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
ECV304細胞系相關產(chǎn)品:H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞
K1735細胞系相關產(chǎn)品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
SKLU01細胞系相關產(chǎn)品:WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
MDA-MB 468細胞系相關產(chǎn)品:U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞
QGP 1細胞系相關產(chǎn)品:H-35細胞、LTEPsm細胞、CATH.a細胞
A375S2細胞系相關產(chǎn)品:H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
Sp 2817細胞系相關產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
MGECs細胞系相關產(chǎn)品:SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞
EST50細胞系相關產(chǎn)品:CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞
SF763細胞系相關產(chǎn)品:H510A細胞、MONO-MAC 6細胞、PBMC細胞
TM3細胞系相關產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
L23/P細胞系相關產(chǎn)品:ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
H-2052細胞系相關產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞
WPMY1細胞系相關產(chǎn)品:TJ905細胞、SNU-C1細胞、KYSE 140細胞
HCC1428細胞系相關產(chǎn)品:P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞
OPM-2細胞系相關產(chǎn)品:NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞
NCI H548細胞系相關產(chǎn)品:HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
H2052細胞系相關產(chǎn)品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞
RCC 7860細胞系相關產(chǎn)品:COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
EU-3細胞系相關產(chǎn)品:PANC0203細胞、Vero 76細胞、DHL-5細胞
P3X63Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:SW 48細胞、CMT-167細胞、Beta-TC-6細胞
HCC-70細胞系相關產(chǎn)品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
NCIH446細胞系相關產(chǎn)品:Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
EVSAT細胞系相關產(chǎn)品:MB49細胞、HCC0044細胞、PVEC細胞
EOC20細胞系相關產(chǎn)品:COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
J82COT細胞系相關產(chǎn)品:SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
CCLP-1細胞系相關產(chǎn)品:NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞
KCL22S細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、SHG-44細胞、SK UT 1細胞
HCC1187細胞系相關產(chǎn)品:ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
HSC4細胞系相關產(chǎn)品:H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞
HSCT6細胞系相關產(chǎn)品:LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
NCIH358細胞系相關產(chǎn)品:NOMO-1細胞、Giant Cell Tumor細胞、COS-1細胞
LC-1Sq細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞
NCI-H1915細胞系相關產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
Ly3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
H1105細胞系相關產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
AAV-293 Cells|腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
Dunn LM8細胞系相關產(chǎn)品:343MG細胞、D283 Med細胞、LNCaP FGC細胞
3T3-F442A細胞系相關產(chǎn)品:rRTEC細胞、MC3T3-E1細胞、SF-295細胞
RPMI-8402細胞系相關產(chǎn)品:SuperTube細胞、SK-MEL-5細胞、HAEC細胞
WPMY1細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 19細胞、526 mel細胞、P31-FUJ細胞
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