"AAV-293細胞：腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞背景資料：我們推薦使用AAV-２９３細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。 AAV-２９３源自普遍使用的 HEK２９３細胞株，但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK２９３細胞是剪切過的腺病毒５型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞。 跟HEK２９３細胞一樣，AAV-２９３細胞反式表達腺病毒E１基因，當共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC, 和E１缺失助質(zhì)粒)時，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
H-2085細胞系相關產(chǎn)品：BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞
VMRCLCD細胞系相關產(chǎn)品：L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
CHL/IU細胞系相關產(chǎn)品：NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞
HIT clone T15細胞系相關產(chǎn)品：NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關產(chǎn)品：X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
HCC1954BL細胞系相關產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
Huh7.5細胞系相關產(chǎn)品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
PanC1細胞系相關產(chǎn)品：TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞
NCI H69細胞系相關產(chǎn)品：SU.86.86細胞、CAL51細胞、SNU-387細胞
MM134細胞系相關產(chǎn)品：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
S37細胞系相關產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關產(chǎn)品：OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
AZ 521細胞系相關產(chǎn)品：A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
SKMEL1細胞系相關產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關產(chǎn)品：CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
NCIH1650細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
NCIH1650細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
H-345細胞系相關產(chǎn)品：V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞
GTL 16細胞系相關產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞
H1404細胞系相關產(chǎn)品：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
HEK293F細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
BetaTC6細胞系相關產(chǎn)品：NIH-OVCAR-3細胞、Hs895.T細胞、A-172細胞
NHDF細胞系相關產(chǎn)品：CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
H-1993細胞系相關產(chǎn)品：Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞
Mel-MeWo細胞系相關產(chǎn)品：UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
E304細胞系相關產(chǎn)品：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
NCM356細胞系相關產(chǎn)品：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
SF539細胞系相關產(chǎn)品：K562細胞、SJ-Rh 30細胞、3T3NIH細胞
SACCLM細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
Helacyton gartleri細胞系相關產(chǎn)品：HCGC細胞、VP229細胞、RBL.2H3細胞
COLO684細胞系相關產(chǎn)品：GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
J 82細胞系相關產(chǎn)品：RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
SNU-407細胞系相關產(chǎn)品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
OCI-Ly 18細胞系相關產(chǎn)品：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
MOLT-3細胞系相關產(chǎn)品：HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
P3J HR-1細胞系相關產(chǎn)品：GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
SUM159細胞系相關產(chǎn)品：DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞
B16 melanoma細胞系相關產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
H441細胞系相關產(chǎn)品：HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞
SW 480細胞系相關產(chǎn)品：Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
PL11細胞系相關產(chǎn)品：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
EO771細胞系相關產(chǎn)品：NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
HSC5細胞系相關產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
CV1細胞系相關產(chǎn)品：OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞
H82sclc細胞系相關產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
CAL 120細胞系相關產(chǎn)品：CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
NCM-460細胞系相關產(chǎn)品：H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
C2-C12細胞系相關產(chǎn)品：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
MLMEC細胞系相關產(chǎn)品：U-266細胞、GDM-1細胞、HuT-78細胞
JTC-39細胞系相關產(chǎn)品：H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
DU4475細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關產(chǎn)品：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關產(chǎn)品：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞
HEM細胞系相關產(chǎn)品：SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞
3T3F442A細胞系相關產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
OV 1063細胞系相關產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
OV 1063細胞系相關產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關產(chǎn)品：Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
SF-539 BT細胞系相關產(chǎn)品：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
OVSAHO細胞系相關產(chǎn)品：WM-266-mel細胞、Hs683T細胞、UWB1.289+BRCA1細胞
5-8F細胞系相關產(chǎn)品：Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞
SHSY-5Y細胞系相關產(chǎn)品：HEL-1細胞、SKLMS-1細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞
KYSE50細胞系相關產(chǎn)品：HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
Hs746T細胞系相關產(chǎn)品：CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
4175細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
RCK8細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
HAPI細胞系相關產(chǎn)品：ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
PANC-04-03細胞系相關產(chǎn)品：MPC-83細胞、ADR-RES細胞、H-II-E-C3細胞
He La細胞系相關產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
HN4細胞系相關產(chǎn)品：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
SRA01/04細胞系相關產(chǎn)品：SUM-149PT細胞、NCI-H2087細胞、RT4-D6-P2T細胞
SHEP1細胞系相關產(chǎn)品：SKRC-39細胞、COLO824細胞、L-02細胞
CHL/IU細胞系相關產(chǎn)品：NCI-747細胞、JeKo-1細胞、H-2081細胞
SUP-B1細胞系相關產(chǎn)品：H-810細胞、High-5細胞、H-3255細胞
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