"NCI-H2030 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
HRPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
MGH-U3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-K8細胞、AR4-2J細胞、PANC1005細胞
細胞生長:貼壁
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
NCI-H2030 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
Namalwa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 253細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Mc Ardle 7777細胞
RPE-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1.6細胞、NTERA2細胞、D-283MED細胞
P3-X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞
8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
細胞傳代方法:1:3-1:4傳代;每周換液2-3次。
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當(dāng)然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈;2)不要頻繁看細胞。對于初學(xué)者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學(xué)者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當(dāng)大,對細胞的傷害也是很大的。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2030 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
TE671/RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞
MALME 3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A204細胞、HaCaT細胞、MDCK II細胞
MDAMB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞
Hs832.Tc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞
RH35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞
CWR-22rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞
NCI-H2030 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
H-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
16HBE14o-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞
SW 1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2/D1細胞、Hs888T細胞、ECV 304細胞
DiFi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
OVCA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
L 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE-1細胞、HPAF-II/CD18細胞、H711細胞
SACC83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSCs(mBMSCs)細胞、MLMA細胞、SF17細胞
RCK-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
A549ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞
293c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
NFHIOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞
HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
CEM-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 468細胞、OCI-AML-2細胞、MDCK (NBL-2)細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
Tissue Culture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
CAL-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
Hs840_T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
PG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
HuH-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
NCI.H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
Panc_05_04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
AHH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
MDA-MB-231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞
TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
IAR20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
NCI H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞
PC-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞
ECC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞
IMR32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
SW 480細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c 3T3細胞、CAL120細胞、NCI/ADR-RES細胞
LA-N-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
3T3 L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20SV細胞、IEC6細胞、NALM 6細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
NCI-H2030 Cells|人非小細胞肺癌細胞系
H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細胞、GM05887細胞、WM 2664細胞
NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細胞、SK-HEP-1細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO K1細胞、HPAF II細胞、HS 683T細胞
JROECL 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-6細胞、HAPI細胞、C3H10T1/2CL8細胞
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