"NCI-H2030細(xì)胞：人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：３-１：４傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
接收細(xì)胞相關(guān)問(wèn)題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過(guò)夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長(zhǎng)不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長(zhǎng)，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會(huì)遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過(guò)細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會(huì)比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時(shí)懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對(duì)懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯(cuò)的，電擊對(duì)細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對(duì)細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對(duì)試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、C12細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞
H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細(xì)胞、T-84細(xì)胞、PLA802細(xì)胞
BpRc1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME1細(xì)胞、H1048細(xì)胞、IM-9細(xì)胞
R 2 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞
H-1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA330細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞
L 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
hFOB 1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞
SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞
KE-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs706T細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞
MCF 7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞
BHK-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞
McA-RH 8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、SCL II細(xì)胞
HLE B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Ly1細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞
HLE B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Ly1細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC366細(xì)胞、CG4細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
L- cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR 106細(xì)胞、32D CL3細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
SCL II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞
NCM-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細(xì)胞、H-220細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
Hs343T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 26細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞
HCCLM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM3細(xì)胞、639 V細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
RS4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3/M細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞
Caco-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、HLF細(xì)胞、J774細(xì)胞
NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THC-8307細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞
CAL 51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac 1.2F5細(xì)胞、Hs27細(xì)胞、L540細(xì)胞
MIA PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H82細(xì)胞、SP2細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞
hFOB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. No. 2細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞、COV 504細(xì)胞
DMS-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U031細(xì)胞、AM38細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
PA317細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞、H3396細(xì)胞
RPMI.8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH250細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞
SW-403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF-1a細(xì)胞、HSC5細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞
639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞
MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞
Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
HKBML細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞
H-1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPECJ2細(xì)胞、K7M2細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞
L-428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞
SK RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10細(xì)胞、NCI-BL2141細(xì)胞、H-322細(xì)胞
Panc2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2-C8細(xì)胞、U266BL細(xì)胞、C 6細(xì)胞
U-2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞
HOP 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞
NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞
A-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co-115細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1623細(xì)胞、H-719細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞
HEK293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 2.03細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞、U-937細(xì)胞
MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞
C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞
BT325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞
SUP-M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞、TE-5細(xì)胞
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
32D.cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Podocyte Clone-5細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞、QBC939細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
OE33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
Hu-P-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞、526mel細(xì)胞
H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 125細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞
TNC-1B12B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細(xì)胞、G-402細(xì)胞、U373MG細(xì)胞
HDMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、H-1963細(xì)胞
KMS-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR10細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞
T1-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細(xì)胞、NB9細(xì)胞、H 9細(xì)胞
AX-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256細(xì)胞、TR146細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞
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