"GAK Cells|人類惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NK 10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
OC-3-VGH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
細胞生長：貼壁
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
GAK Cells|人類惡性黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
JS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
NCI-H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞
BMU-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞
SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
細胞傳代方法：８.４ x １０^４ cells / sq.cm.
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。傳代細胞培養(yǎng)操作步驟：１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２-５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２-３d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
GAK Cells|人類惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞
KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
Capan1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
OsA-CL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
NCI-H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
Scott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
CMT93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞
HUT28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 HSR細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞、QSG7701細胞
SK-MEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞
GAK Cells|人類惡性黑色素瘤細胞系
CT26-clone 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞
Hs 766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞
FHL124細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
SNU761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞
MKN7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
HepG2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
NTera 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
NTera 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
T241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細胞、VMCUB1細胞、MRC5細胞
H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
U-226AR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
hESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
CCD-841-CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞
LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
NCIH810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
4-1st細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HL 60細胞、NCI H548細胞
JS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
JJN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
A-549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB468細胞、HCC1937細胞、P30-OHK細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
B16 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
A-253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI2650細胞、GA-10-Clone-4細胞、SW756細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
HCC-1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞
GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
NPC-TW 039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
MES23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞
Vero-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
P3-X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細胞、Sp2/mIL-6細胞、HEY A8細胞
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
NTERA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-4細胞、NK-92 MI細胞、SW 1353細胞
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
Adeno-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
SK BR 03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3NIH細胞、KTC1細胞、Hs 739.T細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
MN 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞
GAK Cells|人類惡性黑色素瘤細胞系
SUDHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細胞、OCIAML5細胞、U-251_MG細胞
Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-31細胞、Ls-174-T細胞、SGC996細胞
Scott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細胞、LPC-H12細胞、H1355細胞
SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細胞、H-87細胞、NK10a細胞
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