抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
α2巨球蛋白(α-2M)抗體 別 名 A2M; A2MG_HUMAN; Alpha 2 M; Alpha 2M; Alpha-2-M; Alpha-2-macroglobulin; C3 and PZP-like alpha-2-macroglobulin domain-containing protein 5; CPAMD5; DKFZp779B086; FWP007; S863 7.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-alpha 2 Macroglobulin
中文名稱 α2巨球蛋白(α-2M)抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 160kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human alpha 2 Macroglobulin
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
二單辛酯I型標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:
二單辛酯II型標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1g 英文名稱:
庚睪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Testosterone Enanthate CIII
別嘌標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Allopurinol
紫外線吸收劑UV329標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
達(dá)唑標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Mebendazole
環(huán)雌二標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Estradiol Cypionate
地塞米松標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Dexamethasone Phosphate
雷他定相關(guān)雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
3基2,4,6三標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
赤霉 進(jìn)口、國產(chǎn) GibberellinA3 含量:USP級,95105%
赤蘚 進(jìn)口、國產(chǎn) Erythritol 含量:高純,98%
蟲草多糖 進(jìn)口、國產(chǎn) Cordycepspolysaccharide 含量:CP
蟲紅 進(jìn)口、國產(chǎn) Carmine 含量:BR,99%
除草劑 進(jìn)口、國產(chǎn) Basta 含量:超純,99%
去氫酶 進(jìn)口、國產(chǎn) Alcoholdehydrogenase 含量:BR,1000u/mg,TypeV
磁性氧鐵 進(jìn)口、國產(chǎn) Ferrosoferricoxide 含量:5N,99.999%
次高分子MARK 進(jìn)口、國產(chǎn) SDSPAGEMolecularhightweightmarkersforproteins 含量:BR,3500u/mg
次核苷 進(jìn)口、國產(chǎn) Inosine 含量:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
次基蘭 進(jìn)口、國產(chǎn) MethyleneBluetrihydratee 含量:特純,98%,粉末
FAM36A蛋白抗體Minocycline hydrochloride中文名:替加環(huán)素別名:分子式:C23H28ClN3O7
FAM134C蛋白抗體Nisoldipine中文名:尼索地平別名:分子式:C20H24N2O6
成纖維細(xì)胞生長因子受體底物2抗體Benzyl 2-aminoacetate p-toluenesulfonate中文名:別名:分子式:C16H19NO5S
酪氨酸蛋白激酶3抗體2-Benzylacrylic acid中文名:別名:分子式:C10H10O2
磷酸化成纖維細(xì)胞生長因子受體底物2抗體Racecadotril中文名:消旋卡多曲別名:分子式:C21H23NO4S
α2巨球蛋白(α-2M)抗體 Issatchenkia orientalis種屬:Issatchenkia orientalis
分離基物:支氣管真菌病病人的痰
提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:質(zhì)量控制菌株
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:YM培養(yǎng)基:蛋白胨 5.0g,葡萄糖 10.0g,酵母粉 3.0g,麥芽提取物 3g,蒸餾水 1.0L,瓊脂 20.0g,pH6.2
傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件:26-28℃,好氧
存儲條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。東方伊薩酵母