抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-EphA8/Eph receptor A8
中文名稱 酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體
別 名 EEK; EK3; EPH and ELK related kinase; EPH like kinase 3; EphA8; Ephrin Type A Receptor 8 Precursor; HEK3; KIAA1459; Tyrosylprotein Kinase; 2.7.1.112; EPHA8_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 激酶和磷酸酶 細胞類型標(biāo)志物
蛋白分子量 predicted molecular weight: 108kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EphA8/Eph receptor A8
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
康唑相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
沙相關(guān)物質(zhì)H標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:5mg 英文名稱:
相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
相關(guān)物質(zhì)H標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:Amiodarone Related Compound H
酒石氫標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:3g 英文名稱:Potassium Bitartrate (AS)
乳標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Sodium Lactate
卡芬相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Carprofen Related Compound A
伊立替康相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
西他唑相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
貝那普利相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
2,3二二 進口、國產(chǎn) meso2,3Dibromosuccinic 含量:BR
2,3二 進口、國產(chǎn) DAN 含量:AR,99%
2,4,6三(2基)1,3,5三嗪 進口、國產(chǎn) TPTZ 含量:3.5N,0.5㎜
2,4,6三1,3,5三嗪 進口、國產(chǎn) Cyanuricchloride 含量:AR,98%
2,4滴 進口、國產(chǎn) 2,4D 含量:高純,99%
2,4滴 進口、國產(chǎn) 2,4Dsodiumsalt 含量:高純,98%
2,4二基5(3,4,5三氧基芐基)嘧乳鹽 進口、國產(chǎn) Trimethoprimlactatesalt 含量:USP級,85%,845~988mcg/mg
2,4 進口、國產(chǎn) 2,4DCAD 含量:特純,98%
2,4二羥6基 進口、國產(chǎn) 2,4Dihydroxy6methylbenzoicacid 含量:AR,99%
2,4二羥基5基嘧 進口、國產(chǎn) 5Nitrouracil 含量:BR,97%
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體Benzyl 4-Oxo-1-piperidinecarboxylate中文名:4-氧代-1-哌啶羧酸芐酯別名:分子式:C13H15NO3
乙酰基轉(zhuǎn)移酶EID1抗體2-(3-Benzoylphenyl)propionitrile中文名:2-(3-苯甲酰基苯基)-丙腈別名:分子式:C16H13NO
雌激素受體相關(guān)蛋白3抗體4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate中文名:N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐脂別名:分子式:C19H19NO6
雌激素相關(guān)受體β抗體1-Benzoylpiperazine中文名:1-苯甲酰哌嗪別名:分子式:C11H14N2O
甲基固醇羥化酶單加氧酶1抗體4-Benzoyloxy-2-azetidinone中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮別名:分子式:C10H9NO3
酪氨酸蛋白激酶受體A8抗體 Sphingobiumrhizovicinum種屬:Sphingobiumrhizovicinum
分離基物:山橘的根際土壤,臺灣
安全等級:1
模式菌株:yes
應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:108或109
生長條件:28℃Sphingobiumrhizovicinum