抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-DNAJB4/HSP40 homolog
中文名稱 熱休克蛋白家族40抗體
別 名 DjB4; DnaJ (Hsp40) homolog subfamily B member 4; DnaJ homolog subfamily B member 4; DnaJ like heat shock protein 40; DNAJB 4; DNAJW; Heat shock 40 kDa protein 1 homolog; Heat shock protein 40 homolog; HLJ 1; HLJ1; HSP40 homolog.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 38kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DNAJB4/HSP40 homolog
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是熱休克蛋白家族40抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
海雜質(zhì)Ⅰ英文名稱:Iohexol impurity I保存:20℃,避光規(guī)格:50mg絡(luò)絲蛋白一抗
24英文名稱:2 amino 4 chloro phenol保存:20℃,避光規(guī)格:50mg核糖核苷還原酶1一抗
酰化地雷他定英文名稱:Carbamylation of desloratadine保存:20℃,避光規(guī)格:20mg環(huán)指蛋白170一抗
枸地雷他定英文名稱:Desloratadine citrate保存:20℃,避光規(guī)格:100mg環(huán)指蛋白185一抗
鹽黃柏英文名稱:Huang Baijian hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支環(huán)指蛋白10一抗
黃柏英文名稱:Huang Baitong保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥95% 20mg/支RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白一抗
歐前胡素;歐芹屬素;前胡內(nèi),白芷素英文名稱:Imperatorin; parsley belongs to extract B; imperatorin, Radix Angelicae dahuricae B保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支RPS27A一抗
異歐前胡素;白芷素 、異歐芹屬素英文名稱:Isoimperatorin; isoimperatorin, parsley, Shu Suyi保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支RHOG一抗
桃葉珊瑚苷;珊瑚木苷;;杜仲苷英文名稱:Aucubin; coral wood glycosides; Du Zhonggan;保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支α橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白/αSCA一抗
鹽巴馬汀;黃藤素;棕櫚英文名稱:Bamatin hydrochloride; palmatine; palmatine保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支泛素樣蛋白Sumo2/3一抗
羽扇豆英文名稱:Lupeol保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支泛素樣蛋白Sumo2一抗
銀鍛苷、刺蒺藜苷;密蒙花苷;椴樹苷英文名稱:Silver forging glycosides, Tribulus terrestris; dense Linden glycosides linarin;保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支泛素樣蛋白Sumo3一抗
獐牙菜苷;獐牙菜甙;獐芽菜苷; 當(dāng)藥苷英文名稱:Sweroside; swertiamarin; Swertia japonica glucoside; sweroside保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支肺表面活性蛋白C前體肽一抗
獐牙菜苦苷;獐牙菜苦甙; 獐牙菜苦素英文名稱:Swertiamarin; swertiamarin; swertiamarin保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支Syndecan 3蛋白一抗
野黃芩素;金黃紫;高黃芩素英文名稱:Scutellarin; golden yellow and purple base; high baicalein保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad1一抗
京尼平苷;梔子英文名稱:Geniposidic acid; geniposide acid保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3一抗
香英文名稱:Ding Xiangsuan保存:20℃,避光規(guī)格:HPLC≥98% 20mg/支神經(jīng)肌肉接頭蛋白SNTA1一抗
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體Methyl vanillate glucoside中文名:香草酸甲酯葡萄糖苷別名:分子式:C15H20O9
柯薩奇病毒A16型聚合酶3DPhloracetophenone 4'-O-glucoside中文名:根皮乙酰苯-4'-O-葡萄糖苷別名:分子式:C14H18O9
細(xì)胞表面趨化因子受體3抗體Anhydroglycinol中文名:別名:3,9-Dihydroxypterocarpene分子式:C15H10O4
補(bǔ)體C2抗體Orientanol A中文名:別名:分子式:C21H24O7
造血干細(xì)胞抗原CD133抗體3-Hydroxybakuchiol中文名:別名:分子式:C18H24O2
熱休克蛋白家族40抗體 Rhodococcusfascians種屬:Rhodococcusfascians
分離基物:甜豌豆
安全等級(jí):1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:104
生長條件:30℃Rhodococcusfascians