中文名稱:人熱休克蛋白60酶聯(lián)免疫試劑盒 | 英文名稱:Human HSP60 ELISA KIT |
保存條件: 2-8℃ | 純度規(guī)格: 99.99% |
產品類別: ELISA試劑盒 |
人熱休克蛋白60酶聯(lián)免疫試劑盒
方法:雙抗夾心法
保質期:12個月
測定長度: 1-4.5小時 1-3.5小時
優(yōu)點:
有競爭力的價格。 預稀釋的檢測試劑A和B
高靈敏度。 減少進行測試時的步驟數(shù)
高穩(wěn)定性。 所有試劑均可在4℃下保存
保質期12個月。 與其他品牌相比反應更快
保質期12個月
包裝描述:
試劑名稱
數(shù)量
試劑名稱
數(shù)量
96孔板(預包被)
1
96孔板覆膜
2
標準品
2
標準品稀釋液
1×20mL
檢測溶液A
1×120μL
檢測稀釋液A
1×12mL
檢測溶液B
1×120μL
檢測稀釋液B
1×12mL
TMB底物
1×9mL
終止液
1×6mL
濃洗滌液(30×)
1×20mL
說明書
1
測定步驟總結
1.準備所有試劑,樣品和標準品;
2.向每個孔中添加100µL標準液或樣品。在37℃下孵育2小時;
3.吸出并加入100µL準備好的檢測試劑A。在37℃孵育1小時;
4.吸凈并清洗3次;
5.加入100µL制備的檢測試劑B。在37℃孵育1小時;
6.吸氣并清洗5次;
7.添加90µL底物溶液。在37℃下孵育15-25分鐘;
8.添加50µL終止液。立即在450nm處讀取。
需自備的設備及試劑
450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)
單道或多道微量加液器及吸頭
稀釋樣品的EP管
蒸餾水或去離子水
吸水紙
盛放洗液的容器
試劑盒的儲存及有效期
未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
穩(wěn)定性
經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
注意:
試劑盒內酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在首次實驗后 1個月內使用完畢。產品過期時間以盒子上的標簽為準,保質期內所有組分都確保是穩(wěn)定的。
ELISA實驗常見問題分析
ELISA實驗因靈敏度高,特異性強在生物科研上得到了廣泛的認可,但對初學者而言,如不注意實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié),可能會對最終的實驗結果產生比較大的影響,比如實驗出現(xiàn)白板,顯色弱靈敏度低,花板無梯度背景高等現(xiàn)象。下面對以上實驗現(xiàn)象進行一一解析。
1.白板現(xiàn)象
在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中所有孔的顏色均為無色,即無信號呈現(xiàn)。
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:
a.試劑已過保質期,不同批次稀釋液交叉使用。
b.錯加漏加檢測A,檢測B或者底物溶液TMB。
c.洗板或者加樣過程中,酶標記物被污染失活,稀釋液中含有酶抑制劑如疊氮吶等。
d.配置稀釋液的蒸餾水可能被污染。
e.洗滌液是濃縮型的,沒有按比例進行稀釋。
f.酶標記物的活性和效價比較低。
g.溶液的PH值不正確,一般稀釋液的PH值應保持在7.2-7.4。
2.顯色弱靈敏度低
在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中孔的顯色比較淺,即只有微弱的信號呈現(xiàn)。
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:
a.產品過有效期,試劑沒有按規(guī)定進行適當?shù)谋4妗?/p>
b.試劑,標準品或者樣品在使用前沒有平衡到室溫。
c.少加了試劑的量或者加入試劑的稀釋比例不當。
d.洗板或者加樣過程中,酶標物受污染失活。
e.孵育時間和孵育溫度未達到實驗要求。
f.洗滌液稀釋倍數(shù)不符合要求,洗板次數(shù)過多,洗板沖擊力過大,洗板浸泡時間過長。
g.底物溶液TMB顯色時間太短。
3.花板無梯度背景高
在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后,酶標板中的孔有顏色但沒有梯度,背景也可能較高.
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:
a.底物溶液TMB未置于陰涼避光處保存,實驗前溶液已經變藍。
b.孵育溫度過高或者孵育時間過長,發(fā)生了較強的非特異性吸附。
c.沒有按說明書要求洗板,特別是洗板時洗滌液的量少加了。
d.加樣時沒有換槍頭造成交叉污染。
e.花板現(xiàn)象:低濃度或者低活性的包被抗體或者檢測抗體,封閉不足導致的本底不穩(wěn)定,洗板不充分,包被板子的問題。
綜上所述:在ELISA實驗中應注意以下問題:
1.在實驗前應該按相關要求將實驗試劑平衡至室溫。
2.包被抗體和檢測抗體應該是有高活性的且都針對同一抗原。
3.試劑保存:蛋白抗體類試劑保存于-20攝氏度,顯色液洗滌液保存于2-8攝氏度。
4.各試劑在使用前應充分混勻,以保證試劑的均一性和準確性。
5.嚴格控制反應溫度和反應試劑。
6.洗板次數(shù),洗板液的量,洗板液浸泡時間的長短,洗板的力度都是應該注意的問題。
7.相關濃縮液應按要求稀釋到相應比例方可使用,PH值要保持在7.2-7.4之間。
8.在終止反應時盡量避免微孔中存有氣泡。
9.終止反應完成后應該在2min內完成酶標儀讀數(shù)。
特別提示:本公司的所有產品僅用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
成立日期 | 2015-05-29 (10年) | 注冊資本 | 100萬元整 |
員工人數(shù) | 50-100人 | 年營業(yè)額 | ¥ 100萬以內 |
主營行業(yè) | 中間體,化學試劑,醫(yī)藥原料 | 經營模式 | 工廠 |
產品名稱 | 價格 | 公司名稱 | 報價日期 | |
---|---|---|---|---|
¥2600.00 |
VIP9年
|
北京索萊寶科技有限公司
|
2024-12-27 | |
¥2280 |
VIP6年
|
上海澤葉生物科技有限公司
|
2024-12-27 | |
¥2480 |
VIP4年
|
上海博爾森生物科技有限公司
|
2024-12-27 |