"Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
細胞背景資料:骨骼??;C3H
細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:貼壁
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Vero-76細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat Clone E6-1細胞、KMS26細胞、NCIH1694細胞
NCI-H187細胞系相關產(chǎn)品:RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
WISH細胞系相關產(chǎn)品:OLN 93細胞、OVCA433細胞、SW-1116細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關產(chǎn)品:SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
NCI-H1155細胞系相關產(chǎn)品:H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
NCIH2227細胞系相關產(chǎn)品:OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
Adeno-293細胞系相關產(chǎn)品:VMRC-LCD細胞、TSCC1細胞、8402細胞
Hs940-T細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞
UMR106細胞系相關產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
266 Bl細胞系相關產(chǎn)品:GM03671C細胞、KM-H2細胞、SACC-83細胞
KNS62細胞系相關產(chǎn)品:LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞
RAW264細胞系相關產(chǎn)品:TYK-nu細胞、CD18細胞、HIEC6細胞
PANC0813細胞系相關產(chǎn)品:293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
H295R-S1細胞系相關產(chǎn)品:AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞
UMR106細胞系相關產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
EM-3細胞系相關產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
W256細胞系相關產(chǎn)品:HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
NCM460細胞系相關產(chǎn)品:Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
MC38細胞系相關產(chǎn)品:QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
JTC-28細胞系相關產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞系相關產(chǎn)品:RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞
UACC-812細胞系相關產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
GT39細胞系相關產(chǎn)品:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
Loucy細胞系相關產(chǎn)品:Hep G2/C3A細胞、Mc Ardle 7777細胞、Hs294T細胞
H676細胞系相關產(chǎn)品:HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞
Panc-8_13細胞系相關產(chǎn)品:HUV-EC-C細胞、KMST6細胞、NCIH838細胞
SUNE 1細胞系相關產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
HCC-1419細胞系相關產(chǎn)品:Adeno 293細胞、MCFs細胞、INS-1E細胞
NCI H226細胞系相關產(chǎn)品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
HS-294-T細胞系相關產(chǎn)品:HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
COR-L23/P細胞系相關產(chǎn)品:RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞
FDCP1細胞系相關產(chǎn)品:RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞
HRIF細胞系相關產(chǎn)品:CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
CAL 85-1細胞系相關產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、HIBEpiC細胞、SCC-7細胞
HOSEpiC細胞系相關產(chǎn)品:Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
EA hy 926細胞系相關產(chǎn)品:GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
LP-1細胞系相關產(chǎn)品:KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
OE21細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞
Tissue Culture-1細胞系相關產(chǎn)品:CA-46細胞、HCC1419細胞、WC00059細胞
NEC8細胞系相關產(chǎn)品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
COLO394細胞系相關產(chǎn)品:373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞
NTera2 cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:PaTu8988s細胞、253J B-V細胞、CoC1細胞
L6細胞系相關產(chǎn)品:SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
A 253細胞系相關產(chǎn)品:P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
PNEC30細胞系相關產(chǎn)品:Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞
HPC-Y5細胞系相關產(chǎn)品:GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
RPMI 1846細胞系相關產(chǎn)品:AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
PC3M細胞系相關產(chǎn)品:BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
Panc 03.27細胞系相關產(chǎn)品:Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞
AML-EOL-1細胞系相關產(chǎn)品:HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
Ishikawa細胞系相關產(chǎn)品:C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
Hs 636 T細胞系相關產(chǎn)品:SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
NCI-H2108細胞系相關產(chǎn)品:COLO 684細胞、D6P2T細胞、University of Arizona Cell Culture-893細胞
TE4細胞系相關產(chǎn)品:RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H226細胞、H-226細胞、C81-61細胞
PLCPRF5細胞系相關產(chǎn)品:SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞
Sol8 cell line小鼠骨骼肌肌肉母細胞系
HEK-293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品:32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞
ACCM細胞系相關產(chǎn)品:Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞
PANC1005細胞系相關產(chǎn)品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
BC-022細胞系相關產(chǎn)品:EL-4細胞、COLO 206F細胞、RPMI-7666細胞
KYSE 70細胞系相關產(chǎn)品:REC細胞、MFC細胞、NCI-SNU-C2B細胞
N1S1細胞系相關產(chǎn)品:NTera2 cl.D1細胞、CEMC7細胞、OV2008細胞
WISH細胞系相關產(chǎn)品:OLN 93細胞、HEK293EBNA細胞、HNE3細胞
"