"Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:骨骼肌;C3H
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
AU 565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det 562細(xì)胞、OCM1細(xì)胞、WC00097細(xì)胞
Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞
NCI-N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Leukemia 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞
JB6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞
Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
H-345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞
OCI-Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THPI細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞
GM3569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞
CAOV4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞
LLCMK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L615細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞
U20S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP-293細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
UMUC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 1細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞
IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
KALS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA 1細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞、OVCA433細(xì)胞
KM.12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS細(xì)胞、GM02131細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞
Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞系
H-1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-2細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞
CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞
AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞
AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞
SW 756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G422細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞
IGR-OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
SK-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK 2細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞
BetaTC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-OVCAR-3細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞、A-172細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-1E8細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞、RBVEC細(xì)胞
TE10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79-4細(xì)胞、GM12878細(xì)胞、MPC5細(xì)胞
hA549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞
HCC78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-SH細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞、SW-837細(xì)胞
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
SNU-739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-498細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞、AM-38細(xì)胞
SHEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-39細(xì)胞、Panc-08.13細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞
Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx-2細(xì)胞、LU451細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H128細(xì)胞、HASMC細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞
HCC941122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1963細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、H-1793細(xì)胞
Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞
LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞
COLO320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuO9細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞
rRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞
OCI AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞
hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
Jurkat-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞
NCI-SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞
NCI H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞
K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞
N1S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera2 cl.D1細(xì)胞、373MG細(xì)胞、RCF細(xì)胞
201T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞
RPE1-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞
HPB/ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細(xì)胞、H-1299細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞
TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞
U87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC1005細(xì)胞、ECC10細(xì)胞、RCM1細(xì)胞
Rh30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞、High 5細(xì)胞、CD 18細(xì)胞
U87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞、C33-A細(xì)胞
B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞
Sol8 Adherent小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞系
IPLB-Sf21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞
IR983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞、EL-4細(xì)胞
HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞
BEL-7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CO115細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞、High5細(xì)胞
LICR-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK10a細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞
KPL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2219C細(xì)胞、WC00044細(xì)胞、Hs 940.T細(xì)胞
BT-325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU601細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞
Colon-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細(xì)胞、PM6細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞
U266-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞
COV434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞、SUM190細(xì)胞
BSC40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞
GM-346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVHM細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞
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