"SU-DHL-5細(xì)胞:人彌漫大D細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕?xì)胞】1)選對數(shù)增生期細(xì)胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液,計數(shù),使細(xì)胞密度達(dá)5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點(diǎn)降低,使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細(xì)胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達(dá)到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
公司細(xì)胞庫凍存并保種有2300多種各類細(xì)胞系。針對每種不同的細(xì)胞系,公司摸索并積累了大量細(xì)胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數(shù),為您的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究中最基礎(chǔ)、也是最常用的實(shí)驗(yàn)手段。從凍存→復(fù)蘇→傳代→實(shí)驗(yàn),在每一次細(xì)胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護(hù),小心培養(yǎng),心里都是默默承諾:我要護(hù)你一世周全!可是可是……無數(shù)次細(xì)胞都因污染而離我而去,投入的不只是我們貌美如花的青春,還有那一去不復(fù)返的經(jīng)費(fèi)!在細(xì)胞生物學(xué),生物化學(xué),免疫學(xué),神經(jīng)生物學(xué),病理學(xué)……只要涉及細(xì)胞的研究領(lǐng)域,都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中,也就屬支原體最狡猾了,他最善于隱藏自己,因?yàn)楸恢гw污染的細(xì)胞不會馬上死亡,但會改變細(xì)胞的新陳代謝,甚至?xí)淖兗?xì)胞的基因表達(dá)譜,我們就這樣被欺騙了無數(shù)次,誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了??墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗(yàn)中總結(jié)出來,當(dāng)你的細(xì)胞出現(xiàn)了這些癥狀時:生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉(zhuǎn)染效率顯著降低;細(xì)胞復(fù)蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了,也許你的細(xì)胞已經(jīng)被支原體欺凌了!
細(xì)胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
U20S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP-293細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞
NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞
TE 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H23細(xì)胞
HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞
HIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞
HConEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞
A875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU182細(xì)胞、U2932細(xì)胞、H820細(xì)胞
PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞
C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞
Panc_08_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞
Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞
Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549-Taxol細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞、UO-31細(xì)胞
TOV-112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-626細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞
NS1-Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2196細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞、SW-626細(xì)胞
L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞
HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
TMD8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細(xì)胞、H-1915細(xì)胞、SNU387細(xì)胞
HBE 135-E6/E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL-124細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞、HPMC細(xì)胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4B細(xì)胞、KATO III細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞
PFSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞
LA-N-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞、LAD-2細(xì)胞
Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞
RAOEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS62細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞、H-1355細(xì)胞
NK62a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細(xì)胞、Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞
SUP-B15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92.05細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞
Kit 225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞
SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞、50.B1細(xì)胞
INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞
U87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC1005細(xì)胞、ECC10細(xì)胞、RCM1細(xì)胞
MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞
MKN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、Ly3細(xì)胞
HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞
C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞
IPEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞
NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
OVCA433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞
MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞
A.704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞
HPAFII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-1細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
CMT-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac1 2F5細(xì)胞、D341MD細(xì)胞、H1105細(xì)胞
Helacyton gartleri細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCGC細(xì)胞、VP229細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞
FHC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELA-GFP細(xì)胞、T-24細(xì)胞、S91細(xì)胞
EU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0203細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞、DHL-5細(xì)胞
ABC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-852-T細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞、R1800[RA]細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 893細(xì)胞、JVM2細(xì)胞、LS-411N細(xì)胞
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE-2細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞
H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞
CEMC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH28細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞
P3X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細(xì)胞、L6565細(xì)胞、TE 354.T細(xì)胞
NCI-H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1668細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞
KY180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1353細(xì)胞、130-T細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
GT1-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細(xì)胞、H1703細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞
U20S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP-293細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞
SW 1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、H-929細(xì)胞
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