"HPB-ALL細(xì)胞:人T淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書部分
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng):①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無(wú)菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材;②每天觀察細(xì)胞形態(tài),掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn):健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象,應(yīng)立即采取措施,一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持:細(xì)胞系的維持通過(guò)換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來(lái)實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來(lái)說(shuō)都有其自身的特點(diǎn),要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細(xì)胞器脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序:采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí),1~2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),5~10℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí),可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過(guò)線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液(92%血清)2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量?jī)龃嬉?,用吸管吹打制成?xì)胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml)。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中,密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動(dòng)冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過(guò)3分鐘)。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過(guò)高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無(wú)菌狀況,次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20°C不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
Kupffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
Hs940T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/ATCC細(xì)胞、OCI AML5細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞
FDCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M21細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞
Panc 5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WBF344細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞
16HBEo-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH3255細(xì)胞、MH7A細(xì)胞、aNK細(xì)胞
NTera 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1E115細(xì)胞、NK62a細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞
H-661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4M細(xì)胞、MKN7細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞
253J-BV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2/E6E7細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞
FRO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441-4細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞、H716細(xì)胞
NCIH1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-125細(xì)胞、EB-2細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞
T-ALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞、OCI-Ly 19細(xì)胞
MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞
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IPLB-SF 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HITT15細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞
RAMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞、A3細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞
H-1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD15細(xì)胞、H-2135細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞
SUM-102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞
JB 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1417細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞、FC33細(xì)胞
AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
SUM 149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞
H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
LAN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH460細(xì)胞、KMM1細(xì)胞、BTI-Tn5B14細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
BCAP37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSCT6細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞、GM00637細(xì)胞
K-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GFP-Olig2細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、H3255細(xì)胞
ACCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Skin 1細(xì)胞、143B細(xì)胞、SW626細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-548細(xì)胞、LNT-229細(xì)胞、NTERA2-cloneD1細(xì)胞
DH 82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/DDP細(xì)胞、MEG01細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞
MC-116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細(xì)胞、NPA87-1細(xì)胞、H-510細(xì)胞
REC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞
DHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney細(xì)胞、PL11細(xì)胞、Fu97細(xì)胞
ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞
CNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT15細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞
hFOB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. No. 2細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞、COV 504細(xì)胞
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞
JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞
OV 2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOXNY細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞
Jeko1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
JM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H929細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞
MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞
GM00637H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、IM-95細(xì)胞
WEHI3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-732細(xì)胞、HepG2/C3A細(xì)胞、Madison細(xì)胞
LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞
PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK-2細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞
D-341Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT2細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RPMI #8226細(xì)胞
HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞:-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞
C22 (Clara)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192C細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞
HBVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-27細(xì)胞、Kelly細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
K299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞
Emory University-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞
526-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-Serum Free細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞
A-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co-115細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞
JS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O RCC細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞
H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1882細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞
451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-1 Ag4.1細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞
C-28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-32細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞
LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞
hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy ori 3.1細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞、BT483細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞
P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞
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